浊点萃取―高效液相色谱法同时测定水中有机磷农药残留.docVIP

浊点萃取―高效液相色谱法同时测定水中有机磷农药残留 　　【摘要】目的：建立同时测定生活饮用水中3种有机磷农药残留的浊点萃取-反相高效液相色谱分析方法。方法：水样中3种有机磷农药（甲基对硫磷、对硫磷、毒死蜱）的残留经Triton X-114萃取，采用高效液相色谱法，以乙腈-水作流动相，梯度洗脱，最佳波长处测定。采用非离子型表面活性剂Triton X-114进行浊点萃取，分别优化了影响萃取效率的表面活性剂浓度、盐浓度等因素及色谱条件。结果：在优化的条件下，待测农药的质量浓度在0.05～2.0mg/L范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r≥0.9991），水样加标回收率在80.0%～101.9%之间，相对标准偏差（RSD）为2.50%～7.40%；对于50.0ml水样，该方法的检出限为0.20～0.50g/L。结论：本法简便、快速、准确、灵敏度高，能满足生活饮用水中3种有机磷农药残留的分析要求。。 　　【关键词】浊点萃取 高效液相色谱法 有机磷农药 生活饮用水 　　水质安全直接关系到人体健康。我国生活饮用水卫生标准规定[1]，甲基对硫磷、对硫磷、毒死蜱的限值分别是0.02mg/L、0.003mg/L、0.03mg/L。目前有机磷农药主要有气质、液质联用等测定方法[2]。样品提取多采用液液萃取，该法耗时，使用较多有机溶剂，给环境及操作者带来危害。浊点萃取（cloud point extraction， CPE） 作为一种新兴的样品预处理方法，具有萃取效率高、操作简单、绿色环保等优点[3]。本文采用浊点萃取进行样品前处理，建立了生活饮用水中甲基对硫磷、对硫磷、毒死蜱3种有机磷农药残留同时测定的高效液相色谱分析方法，能满足生活饮用水中农药残留分析的要求。 　　1、材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　高效液相色谱仪，HP1100；色谱柱：Eclipse C18柱；离心机；pH计。有机磷农药标准：甲基对硫磷、对硫磷、毒死蜱（纯度≥99.5 %）。农药标准储备液：分别准确称取上述农药标准品， 用乙腈溶解配制成浓度为1.00 mg/ml标准储备液；取适量农药标准储备液用乙腈逐级稀释，配制成浓度为10g/ml的标准应用液，置于-20℃冰箱保存。实验用水为超纯水（18.2 MΩ?cm）；100g/L NaCl溶液；50g/L Triton X-114溶液；乙腈。 　　1.2 样品 生活饮用水（取自成都市）。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 色谱条件 色谱柱为Eclipse C18柱（150×4.60mm，5μm ）；流动相：乙腈+水；梯度洗脱程序为65%乙腈（v/v）0～5min线性上升至95%，并保持至分析结束；流速为1.0 ml/min；甲基对硫磷、对硫磷在波长275nm处测定，毒死蜱在波长230nm处测定；柱温30℃；进样量20 ?l。 　　1.3.2 标准曲线的绘制 取各有机磷农药的标准储备液混合，用乙腈逐级稀释，配制成浓度为0.05， 0.10， 0.25， 0.50， 1.00，2.00μg/ml的混合标准溶液。进样20μl，以待测农药的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 　　1.3.3 样品处理 取过滤后的水样50.0ml，加入100g/LNaCl溶液1.0ml、50g/LTriton X-114溶液1.4ml，35℃水浴加热30min后离心（2500r/min，10min），取有机相层用乙腈定容至0.50ml备用。 　　2、结果与讨论 　　2.1 色谱条件优化 　　2.1.1 检测波长的选择 实验对3种待测农药自190 nm～400 nm进行光谱扫描。实验结果表明 　　在275nm处测定甲基对硫磷和对硫磷、230nm处测定毒死蜱能获得较高灵敏度。 　　2.1.2 流动相及洗脱方式的选择 甲醇、乙腈常作为流动相使用。本实验结果表明乙腈优于甲醇，水相pH值对分离影响不大，故选择纯水作为流动相水相。采用梯度洗脱方式，65%乙腈（v/v）0～5min线性上升至95%并保持至分析结束时实验效果较好。 　　2.1.3 流速和柱温对分离的影响 在0.7 ～1.2 ml/min范围内改变流速进行色谱分析。实验结果显示1.0ml/min为最佳分析流速。分别改变柱温20～40℃，实验结果表明最佳柱温为30℃。 　　2.2 浊点萃取条件的优化 　　2.2.1 表面活性剂用量的选择 实验考察了不同体积的50g/LTriton X-114对3种有机磷农药萃取效率的影响。当表面活性剂用量小于1.4ml时，随着表面活性剂含量的增加，待测农药的萃取效率也增加，当体积达1.4ml时，待测有机磷农药的回收率达到最大值，故本实验选择50g/LTriton X-114的使用体积为1.4ml。 　　2.2.2 盐含量对