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禽胰多肽及其受体的免疫组化研究 摘要 c 禽胰多肽(avianp＆ncreati 多肽细胞分泌的一种多肽。大量实验研究表明：禽胰多肽具有促进 畜禽采食、加快生长发育、调节胃肠道运动、影响内分泌活动等生 理作用。本实验进行了以下几方面的研究：①以Ca，(PO。)，沉淀法 获得自制的APP粗品，经sephadcx—G50柱层析将其纯化。⑦用超 离心法分离并纯化鸡小脑APP受体，SDS—PAGE检测受体纯度。③以 高纯度鸡小脑APP受体作为抗原免疫家兔，获得兔抗APP受体多克 散实验鉴定其无异质血清抗体。④一抗血清经硫酸铵盐析， IgG纯度。 在上述研究工作基础上，继续动物试验：选用182只从型肉 鸡被随机分为7组，每组26只，其中I、II、III、Ⅳ试验组分别 自制的APP粗品，V、VI试验组分别以14、28ug／只．天注射经ca， (PO．)：沉淀法自制的APP粗品，Ⅷ组设为对照。分别于实验后第 14、28、4 2天每组抽取4只宰杀，立即收集各组心、肝、脾、肾、 胰、小脑、十二指肠前，中，后三段组织进行石蜡包埋，切片，用 免疫组化SABC法进行显色。结果表明：各组心、肝、肾、胰、脾、 小脑、十二指肠前，中，后三段组织均有阳性染色，证明以上组织 存在禽胰多肽受体。图象统计软件分析结果表明：试验组和对照组 之间禽胰多肽受体的表达量无显著性差异。但不同日龄组的禽胰多 肽受体的表达量差异显著。以上实验结果为进一步探索禽胰多肽的 生理功能提供了基础。 关键词 禽胰多肽 受体 免疫组化 综述 禽胰多肽(avian pancreatic 年在分离纯化小鸡胰岛素时偶然发现的。APP由36个氨基酸残基组成，是 胰脏胰多肽细胞分泌的一种多肽。大量实验研究表明：禽胰多肽具有促进 畜禽采食、加快生长发育、调节胃肠道运动、影响内分泌活动、保护肝细 胞膜的完整性及细胞活性等生理作用。 1禽胰多肽的研究进展 1．1APP的生理功能 1．1．1矗PP促进禽类采食、消化吸收、生长发育 APP能促进禽类采食己被证实。但APP对消化吸收系统的作用却说法不 一。Duke等“1给鸡静注APP，并以插管法收集胃肠道消化液的分泌量．发现 以7．5ng／mlAPP量注射时，胃肠道的收缩频率降低；以15ng／ml量注射时， 其胃肠道消化液的分泌量明显降低，且收缩频率也明显将低．胰液和胆汁 的分泌也受到明显的抑制．因此，认为APP的功能是降低胃肠运动并抑制 APP，发现母鸡的食物吸收量明显下降，体重恢复。然而近年来的报道资料 证明。11：APP能抑制胃肠道腺体分泌、延缓胃排空和十二指肠运动，从而 使胃肠道有充分的时间来消化饲料，傅伟龙等[2001]给粤黄公鸡分别皮下 tl 注射3、6和12 g／kgAPP纯品，以及6、12和24肛g／kg的APP粗品， 结果表明：注射高剂量粗品APP可提高鸡的采食量、提高饲料转化率、提高 鸡只胴体质量和全净膛质量，鸡只生长速度加快。而一定量的纯品APP也 可促进鸡只生长，但不明显。hPP还可提高肌细胞内DNA和RNA的含量，促 进蛋白质的合成。3。 l_1．2 APP影响动物内分泌 代建国等伽报道APP可以提高血中生长激素、T3、T4的含量。Grobeeker ．2． 等“”报道APP和神经递质(一元胺)共存，且在生理活动中有协同作用。 些外周和中枢神经系统，APP和儿茶酚胺共存，且相互影响。APP还参与感 觉信息的第～次换元过程“3‘“1。 Albers等“”给仓鼠视交叉上核区注射APP，发现其昼夜节率发生改变。 Gates等“”给患肥胖症的新西兰小鼠腹腔注射APP，发现其胰岛素、血糖和 体重均恢复至正常。Fuxe等。”给猪饲喂APP后，发现猪呼吸频率下降。Ito 等“8发现APP对大鼠血管活性肠肽(VIP)调节血管平滑肌的松弛功能有抑 制作用。APP还抑制阿托品对猫下颌腺和鼻粘膜层血管舒张的作用“…。APP 还参与中枢神经对食物吸收和胃液分泌的调节过程。 1．2APP结构特征与基因研究 Kimmel“21等于1968年首次分离并纯