生物化学 09 第九章 基因信息的传递.ppt

第 九 章 基因信息的传递 （Transmission of Genetic Information） 第 一 节 DNA的生物合成 （DNA Biosynthesis） 2.双向复制 DNA 复制时，从复制起始位点开始向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 3.半保留复制 DNA复制时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。 子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 半保留复制的理论设想 半保留复制的证据——科学实验 实验结果说明 子一代DNA双链中，一股是15N单链，从亲代接受和保留下来的；另一股是14N单链，完全是新合成的。 Messelson和Stahl的实验支持半保留复制。 半保留复制的意义 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 遗传的保守性是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 在强调遗传恒定性的同时不能忽视其变异性。 4. 半不连续性复制 5.高保真性复制 （二）DNA复制的酶学 1.DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol或DDDP 活性（作用）有两方面： 5??3? 的聚合活性， 延5??3?方向延长脱氧核苷酸链。 核酸外切酶活性（两种情况） 3? ? 5?外切酶活性，能辨认错配的碱基对，并将其水解。 5? ? 3?外切酶活性，能切除突变的 DNA片段。 DNA聚合酶催化的化学反应 复制过程中脱氧核苷酸的聚合 核酸外切酶活性 大肠埃希菌的DNA聚合酶 DNA-pol Ⅰ DNA-pol Ⅱ DNA-pol Ⅲ 真核生物的DNA聚合酶 2. 解螺旋酶、引物酶和单链DNA结合蛋白 DNA分子的碱基埋在双螺旋内部，只有把DNA解成单链，它才能起模板作用。 3. DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase) DNA拓扑异构酶： 简称拓扑酶，分为拓扑酶Ⅰ、拓扑酶Ⅱ 拓扑酶作用特点： 既能水解 、又能连接磷酸二酯键 4. DNA连接酶 （三）DNA复制的过程 解链过程 DnaA、B、C三种蛋白参与 (2) 引发体和引物 引物的合成 2. 复制延长(replication elongation) 复制的延长指在DNA-polⅢ催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中子链的3ˊ-OH上，其化学本质是3ˊ，5 ˊ -磷酸二酯键的不断生成。 复制的过程 冈崎片断的连接 二、逆转录(Reverse Transcription) 以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录(reverse transcription)。 催化逆转录的酶称为逆转录酶(reverse transcriptase)。 逆转录酶的活性 逆转录酶具有三种酶活性： 依赖RNA的DNA-pol活性 以RNA作模板合成DNA单链，形成RNA-DNA杂化分子 RNase H活性 水解杂化分子中的RNA单链，生成DNA单链模板 依赖DNA的DNA-pol活性 以DNA作模板合成DNA单链，形成双链DNA分子 逆转录病毒在细胞内的逆转录现象 (二)逆转录的意义 加深了人们对中心法则的认识：逆转录现象说明，至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 拓宽了RNA病毒致癌致病机制的研究。 逆转录酶是获取基因工程目的基因的常用工具酶。 三、DNA损伤与修复（DNA Damage and Repairing） DNA复制中发生错误或者是在各种理化因素的作用下，导致DNA分子上碱基的变异称为DNA突变（mutation)，或称为DNA损伤(damage)。 生物体内纠正DNA 复制或环境因素导致的DNA分子上的某些改变，称为DNA损伤的修复（repairing)。 （一）DNA突变的类型 与疾病有关的点突变例子 镰刀形红细胞贫血 β基因（编码链 GAG→GTG ） HbS = α2β26Glu→Val（β链） 膀胱癌细胞 c-rasH基因（编码链GGC→GTC） 表达产物12位Gly→Val 缺失或插入可导致框移突变 框移突变 是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。 重排的例子 （二）DNA损伤的修复 修复的主要类型 1.光修复(light repairing) 2.切除修复(excision repairing) 最重要、有效的方式 3.重组修复(recombination repairing) 4.SOS修复 SOS修复