桑叶中1脱氧野尻霉素的检测、提取及其生理活性研究.pdfVIP

桑叶中卜脱氧野尻霉素的检测、提取及其生理活性研究 摘 要 糖苷酶、葡萄糖淀粉酶的活性，具有抗病毒、减肥和增加胰岛素敏感性等多种 重要生理功能。本文首先利用反相高效液相色谱建立了检测桑叶中DNJ含量的 方法。利用该方法检测了132份桑树品种的DNJ含量，分析了不同纯化工艺对 提高桑叶DNJ纯度的影响。利用糖尿病模型小鼠研究了DNJ的降血糖活性。 为了测定桑叶中1．脱氧野尻霉素(DNJ)含量，我们建立了以芴甲氧酰氯 8．50硼酸盐为衍生化缓冲液时，衍生化和RP．HPLC检测效果最好。反相高效 液相色谱一紫外检测法检测DNJ时，流动相中乙腈：0．1％一醋酸为55：45(V／V) 时色谱分离效果最好，DNJ．FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系， 相关系数为0．9852。 在建立了检测方法后，我们对132个不同品种的桑叶中DNJ含量进行了测 中，竹场2号的DNJ含量最高，达到O．1472％，观音桑的DNJ含量最低，为 0．01 34073％。此外，不同叶位的桑叶的DNJ含量不同，随着桑叶发育成熟， DNJ的含量从上叶位到下叶位逐渐降低。 根据以上实验结果和桑叶价格、产地等方面的综合因素，我们确定了作为 最终提取原料的桑叶材料。利用该材料，以乙醇结合超声处理所得的粗提物中， 和硅胶树脂分级纯化后，纯度最终可达到19．0857％，符合食品添加剂的要求。 为了调查DNJ生理活性，我们以糖尿病小鼠模型为研究对象，将DNJ添 加到饲料中喂养小鼠，并和喂养阿卡波糖及喂养普通饲料的小鼠进行对比，来评 价DNJ长期食用抑制糖尿病的作用。这～我们首创的喂养方法，避免了常规灌 胃方法对小鼠的伤害，保证了分析结果的可行性。结果表明：喂食高剂量DNJ (40mg／kg)40天后，小鼠血糖显著降低，与喂饲正常饲料的模型差异达到显 关键词：1．脱氧野尻霉素 检测方法 提取纯化 桑树品种 降血糖效果 and functional Detection，extraction activityanalysis ofthe from leaves 1-deoxynojirimycinmulberry ABSTRACT leaveshasa of 1一deoxynojirimycin(ONJ)inMulberry varietyimportant physiologicalfunction，such and inhibition， asⅡ-glucosidaseglucoamylase lossandinsulin sensitive anti-virus，body weight sensitivityincrease．Firstly，a methodofRP-HPLC-UVwasestablishedto detectDNJcontentsin leaves． mulberry the not measuredDNJ 132 of method，we contentsin varieties Using only mulberry， butalsos