rna干扰技术的演进及其在基因功能和基因治疗研究中的应用.pdfVIP

( ) 中南大学学报 医学版 　2005 , 30 ( 1) ( ) 102 J Cen t S ou th Un iv M ed S ci RNA 干扰技术的演进及其在基因功能和基因治疗研究中的应用 吕　辉 ,贺智敏 (中南大学肿瘤研究所 , 长沙 4 10078) ( ) ( ) [摘要 ] 　RNA 干扰 RNA interference, RNA i 是指双链 RNA doub le strand s RNA , d sRNA 引起的 mRNA 水平 互补序列基因表达的关闭 ,即序列特异性转录后基因沉寂 ,是生物体进化过程中抵御外来基因和病毒感染的进化 保守机制 。RNA 干扰技术不仅被广泛地运用于基因功能研究 ,而且在基因治疗中显示出极大潜力 。体外 RAN 干 扰技术包括双链 RNA 的合成 、基因导入及干扰作用评价等 。本文阐述了近年来这一新兴生物学技术的发展与演 进以及在基因功能及基因治疗研究中的应用和前景 。 ( ) 关键词 : RNA 干扰 RNA i ; siRNA ; 基因沉寂 ; 基因治疗 [中图分类号 ] 　Q78　　　　[文献标识码 ] 　A 　　　　[文章编号 ] 　1672 7347 (2005) 0 1010204 　　早在 1995 年康乃尔大学 Guo 等 [ 1 ] 根据研究结 则 ,但其作用分为 2 个阶段 [ 3 ] : 一是起始阶段 : 由 ( ) 果提出正义 RNA 可能同反义 RNA 一样能有效抑制 RN a se Ⅲ核酸酶 D icer 降解 d sRNA 为 2 1～23个碱 互补序列基因表达的推测 ,但当时并未取得十分令 基的小分子片断 ( sm all in terfering RNA s, siRNA s) 。 人信服的解释 。1998 年 F ire 等 [ 2 ] 研究发现这种抑 这些片断为双链结构 ,其 5 端′被磷酸化 , 3 端′有 2 个 制并不是单独正义链的作用 ,而是正义链中污染了 碱基突出 ,是 RNA 发挥干扰作用的重要结构 [ 4 ] ; 二 反义链后形成的双链 RNA 所致 。他们称此基因沉 是效应阶段 : siRNA 与多种蛋白成分结合形成 RNA ( ) ( 默现象为