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动物细胞融合与单克隆抗体 (2).pptVIP

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温故而知新——植物细胞杂交(马铃薯番茄) 5、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 * 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 植物细胞的融合 杂种细胞AB 杂种植株 脱分化 愈伤组织 再分化 植物组织培养 原生质体B 原生质体A 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞A 植物细胞B 三、动物细胞融合 1.概念: 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。 2、动物细胞融合基本原理: 与植物原生质体融合的基本原理相同,即细胞膜的流动性 3、诱导方式 物理法: 化学法: 生物法: 灭活的病毒 电激、振动、离心 聚乙二醇(PEG) 例如:仙台病毒 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂种细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 生物法: 灭活的病毒 (丧失感染性、保留抗原结构) 4.过程: 用途 诱导方法 细胞融合的方法 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 获得细胞或细胞产物 6、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们:科学技术是不断发展的。那么,实现动物细胞融合有什么意义呢? 打破生殖隔离,使远缘杂交成为可能; 广泛应用多个学科领域; 重要用途:制备单克隆抗体。 四、单克隆抗体 自主阅读P52:传统的抗体的生产方法及缺陷是什么?  1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生特异性抗体。  2.动物在免疫反应过程中,体内产生特异性抗体种类可达百万种以上,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。  3.但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。   4、在体外,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。  产量低、纯度低;而且制备抗体特异性差。 分析: B淋巴细胞与抗体的关系 1、单克隆抗体McAb(概念) 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。   那么,如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体?(即单克隆抗体)  一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞(癌细胞)能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 2、设计方案: 动物细胞融合 创始人:米尔斯坦 单克隆抗体 既能产生特异性抗体,又能大量繁殖 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 只有杂种细胞才能活 动物细胞培养 3.单克隆抗体制备过程 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 *

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