动物细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 动物细胞融合 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细 胞 核 过程： 病毒颗粒 动物细胞 穿通细胞膜 融合细胞 连接融合 杂种细胞 制备单克隆抗体 用途： 二、单克隆抗体 什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的免疫球蛋白。 B淋巴细胞产生抗体。 B淋巴细胞与抗体 　　１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 　　２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　　３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 1 .单克隆抗体 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 　　特点： 　　　特异性强、灵敏度高 如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 2.单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 为何要经过两次筛选? 思考： 1、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理 和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 3.单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： a、临床诊断 b、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 4.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 四.动物的胚胎移植 解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。 胚胎移植技术 试管动物（婴儿）培养过程 卵细胞 精子 体外受精 受精卵 胚胎 新个体 母体子宫内 孕育、产出 五、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1、动物细胞全能性的表现程度不同 受精卵 胚胎干细胞 多能干细胞 单能干细胞 体细胞 体细胞核具有全能性 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 2、动物体细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。 3.培育过程 去核卵细胞 体细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎） 胚胎移植 母体子宫 妊娠、出生 个体 4、原理 动物体细胞核具有全能性 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 克隆羊的成功证明了什么？ 1、动物体细胞核具有全能性； 2、细胞质具有调控细胞核发育的作用。 动物体细胞核移植是一种无性繁殖技术， 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 意义： 1、有利于遗传疾病的治疗，优良品种的培育 2、对物种的优化、濒危动物的保护和 转基因动物的扩群有重要意义 3、降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率 体细胞核移植技术存在的问题： 许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。  动物细胞特点？ 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需