葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡信号传导途径的研究.pdfVIP

诊断学理论与实践2007年第6卷第6期 525· · 论 著 · 葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞 凋亡信号传导途径的研究 胡 亮 ， 倪培华 ， 徐 洪 ， 赵涵芳 ， 吴洁敏 ， 钱关祥 (1．上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室，上海 200025； 2．上海交通大学医学院附属瑞金医院检验系，上海 200025) 【摘要】 目的：探讨葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK．2)凋亡的信号传导途径。方法：利用葡萄糖诱导 细胞凋亡：将不同浓度葡萄糖作用于HK一2细胞不同时间，并经透射电镜观察、流式细胞仪(FCM)检测凋亡细胞。采用 抑制剂拮抗葡萄糖诱导凋亡：分别将不同浓度的蛋白激酶C抑制剂(hypericin)、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)抑制剂 (apopain)、蛋白酪氨酸激酶抑制剂(genistein)、一氧化氮合酶抑制剂(NAME)作用于HK一2细胞30 min，再加50 mmolflL 葡萄糖作用48 h，后行FCM检测HK一2细胞凋亡情况。结果：50 mmol／L葡萄糖作用48 h可诱导HK一2细胞发生凋 亡，并可通过透射电镜观察到凋亡小体，而FCM检测发现 10。mmol／L hypericin、10-4 mmol／L和 104 mmoI／L apopain、 10～mmol／L genistein、10 mmol／L NAME可明显抑制葡萄糖诱导的HK一2细胞凋亡。结论：蛋白激酶C、caspase一3、蛋 白酪氨酸激酶、一氧化氮(NO)都参与了葡萄糖诱导HK一2细胞凋亡的信号传导过程。 关键词：人肾皮质近曲小管上皮细胞： 细胞凋亡； 信号传导 中图分类号：R587．2 文献标识码：A 文章编号：1671—2870(2007)06—0525—05 A study on the signal transduction pathway of human kidney一2 cells in apoptosis induced by glucose HU Lianf， NI t—hua2,XU Honf，ZHA 0 Hart-fangI，WU Jie—min2,QlaN Guan—xians~． i．Department of Biochemistry，Shanghai Jiootong University School of Medicine，Shanghai 200025,China；2．Faculty of Medical Laboratory，Ruijin Hospital， Shanghai Jiaotong University School of Medicine，Shanghai 200025,China [Abstract] Objective To study the signal transduction pathway of human kidney一2 (HK一2)ceils in apoptosis induced by glucose．Methods HK一2 cells were incubated in glucose with difierent concentration．In 6 h，1 2 h，24 h，36 h and 48 h of incubation．the HK一2 apoptotic ceils were assessed by flow cytometry(FCM)．The apoptotic body of HK一2 ceils cuhured with 50 mmol／L glucose after 48 h was detected by transmission electron microscope。 The glucose—indu