蝴蝶兰叶基腐病病原鉴定及生物学特性.pdfVIP

第28卷 第4期 热 带 作 物 学 报 Vo1．28 No．4 2007年12月 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CR0PS Dec．2Oo7 蝴蝶兰叶基腐病病原鉴定及生物学特性 林清洪 林光荣 曾碧玉 章 宁 刘福平 福建省亚热带植物研究所 福建 厦门 361006 摘 要 叶基腐病是蝴蝶兰的1种重要病害。经组织分离，致病性测定，鉴定其病原菌有性阶段为红球丛赤 壳(Nectriahaematococca)，无性阶段为茄病镰刀菌(Fusarium solani)，首次发现叶基腐病的有性阶段。病原菌生长 的温度范围在 13~38℃，最适温度为28℃；病原菌要求较高的湿度，相对湿度90％以上有利于分生孢子萌 发；该菌能适应于较广泛的pH值范围，但以pH为6．5时最适，它能有效地利用多种碳源，但以蔗糖和葡萄糖 为最佳；也能利用多种氮源，其中以蛋白胨、尿素、硝酸铵为好，而硫酸铵、磷酸二氢铵不利于病菌生长及产孢。 关键词 蝴蝶兰 叶基腐病 红球丛赤壳 茄病镰刀菌 物学特性 中图分类号 $682．31 S436．8 蝴蝶兰(Phalaenopsis)为兰科，蝴蝶兰属的美丽草本花卉，其姿态优美，花色艳丽，形似蝴蝶，开花期 长，在热带兰中素有“兰花皇后”的美称，深受世界各国人民的喜爱。近几年，蝴蝶兰在国内的年宵花卉 市场上无比畅销，尽管种植数量迅速增加，高质量的蝴蝶兰仍能销售一空。同时蝴蝶兰的国际需求量也 不断增加，2002年，其在荷兰花卉市场盆花排行榜上已由第 l0位跃居第2位。然而，在蝴蝶兰的栽培 中，常受蝴蝶兰叶基腐病的危害，最下部叶基受侵染后，产生黑色小点，水渍状，形态半圆形或不规则， 后期叶片失水黄化、红化，叶基部出现灰白色菌核，红褐色的子座组织，最后病斑扩展整个叶基部，叶片 断裂、脱落，继续侵染上一片叶基部，直至整株枯死，发病率轻者为5％，重者达到20％左右，严重危害 蝴蝶兰的人工栽培。关于蝴蝶兰叶基腐病国外未见报道，国内科普书中有简单提过，如称黄叶病、镰刀 菌病、黑头病等，命名比较混乱 1，刘淑艳等【 1首次测得蝴蝶兰基腐病菌rDNA1TS区序列。但不涉及病 原菌种类鉴定。为此，笔者对该病害的病原菌进行分离培养、鉴定和生物学特性研究，为有效防治该病 害提供科学依据。 1 材料与方法 组织分离：于2o05年7～8月，在厦门市、福清市、漳洲市等地蝴蝶兰生产基地采集不同品种的病 株，带回实验室后，尽快进行组织分离和纯化，直至获得纯菌种【51。接种试验：将斜面培养纯化的蝴蝶兰 叶基腐病菌配成孢子悬浮液，其孢子密度以在(10x10)低倍镜下观察，每个视野 10~20个孢子。选择无 病株健叶，用毛笔沾孢子悬浮液涂刷下面叶基部，用湿脱脂棉保湿，以清水处理为对照，定期观察症状is]。 1．1 病原菌鉴定 1．1．1 单孢分离 本实验采用单孢子分离注射器法。用单孢子分离注射器吸取已稀释好的孢子悬浮液 1 mL，轻轻摇动，细心在灭菌培养皿中滴下悬浮液，每个培养皿滴 1个悬滴，在低倍镜下检查，凡是悬滴 中只有 1个孢子的培养皿，倒入已溶化的PSA培养基(马铃薯200 g，蔗糖 18 g，琼脂 18 g，水1 000 mL) (45℃左右)，待凝固后，置于25℃恒温箱中培养，约2 d左右可长出菌落，挑取菌落边缘小菌块移植到 PSA斜面上纯化培养，供鉴定用【7】。 1．1．2 培养性状观察 将单孢分离的菌种移植在定量 15 mL的PSA平板上培养5 d，后用灭菌打孔器 (直径为2 mm)切取大小一致的培养圆块，移植于定量 15 mL的PSA平板中间，每皿1块，重复10次， 置于25℃下培养4 d后，求出其生长速度，培养5 d后，观察菌落形态、质地、颜色【】】】。 1．1．3 病原菌形态观察 挑取纯菌落制片观察大、小型分生孢子的形态，分隔数，同时进行显微测量其 福建省自然科学基金项目资助(Zo5l6o61) 林清洪 男，副研究员。研究方向：植物病原真菌学 联系电话：0592—5759163 收稿日期：2007—02一O1 修回日期：2007—05—09 热 带 作 物 学 报 28卷 大小，大小型分