荧光定量PCR测定端粒长度.pdfVIP

JMedMol 医学分子生物学杂志。2009，6(6)：494-497Biol，2009，6(6)：494-497 DO!：10．3870／j．issn．1672-8009．2009．06．005 荧光定量PCR测定端粒长度 王敏敏，杨浩，刘广义，陈大进，陈文清，蔡洁茹，周芹，谢易，陈芷珉， 陈莹，王慧萍，冯时，王宇成，茅幼英，姜虹，陈江华 浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心杭州市，310003 【摘要】 目的’应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Q—PCR)方法测定端粒长度。方法选取9种人类 细胞株，提取基因组I)NA，采用Q—PCR方法测定相对T／S比率，DNA印迹法测定末端限制性片段(TRF) 长度，进行二者之间的相关性分析。结果定量PCR测定端粒长度相对IVS比率为0．68±0．57，DNA印 用荧光定量PCR方法测鼍端粒长度具有重复性好、省时、简便、可靠的特点，町高通量处理大量样品。 【关键词】 荧光定量聚合酶链式反应；端粒长度测定；T／S比率 【中图分类号】 R73．34 TelomereMeasurement PCR byQuantitative WANG Minmin，YANGHao，LIU Jieru，ZHOU Guangyi，CHENDajin，CHENWenqing，CAI Yi，CHEN Shi，WANGYucheng， Qin，XIE Zhimin，CHENYing，WANGHuiping，FENG MAO Youying，JIANGHong，CHEN Jianghua First Medical Center，The Hospitalof College，ZhejiangUniversity，Hang- Nephrology Affiliated zhou，310003，China To PeR．Methods determinerelativetelomere 【Abstract】0bjective lengthbyquantitative GenomicDNAwasextractedfrom9 ofhumanceils．RelativeT／Sratiosmeasured by types quantita- tivePCRwere withrelativemeanterminalrestriction inthe compared fragment(TRF)lengths same measuredtraditionalSouthernblotmethods．ResultsRelativeR／Sratiomeasured samples by was meanTRF was Iinear a- relative by0．PCR0．68±0．57，and length8．57±2．34．Byregression correlation the ofT／SratiotoTRF nalysis，the coefficient，R2，forrelationship length，．Was demonstratedmeasurementofrelative te— Wehave