酶荧光毛细管分析法测定微量血清中乳酸脱氢酶活性.pdfVIP

10. 3724/SP.J. 1096.2012.11154 酶荧光毛细管分析法测定微量血清中乳酸脱氢酶活性 李乔婧1 李永生1 周朗1 杨微1 高秀峰2 1四川大学化学工程学院，成都610065 2四川大学华西基础医学与法医学院，成都610041 基于丙酮酸/还原型辅酶Ⅰ/乳酸脱氢酶(LDH)/乳酸/氧化型辅酶Ⅰ荧光猝灭体系和荧光毛细管分析技 术，建立了可用于微量样品中LDH酶活性测定的方法。优化的测定条件为：激发及发射波长分别为350和 460 nm；测定温度为25℃；酸度为pH 6.5;NADH浓度为300 μmol/L;丙酮酸浓度为1.2 mmol/L。本方法的测定 范围为50～1500 IU/L，检出限为30 IU/L，相对标准偏差2.1％～2.2％(n=10)，回收率在96.4％～105％范围内。 本方法操作简单，每次测定仅需样品2.0 μL、试剂18.0 μL,分析速度约为30样/h，利用本方法测定了微量血清 中LDH的活性。 酶活性；乳酸脱氢酶；荧光毛细管分析；血清 2011-10-12 2012-02-12 时间变化的反 因此，可以根j 1.5 rain时，本 1， 体系，其缓a 用PBS，使n @@1. ZHU Zhong-Yong. Practical Laboratory Medicine. Beijing: Peoples Military Medical Press, 1992:329～330 朱忠勇.实用医学检验学.北京：人民军医出版社，1992：329～330 @@2. Minoura N, Yamada S, Karube I, Kubo I, Suzuki S. Anal. Chim. Acta, 1982, 135(2): 355～357 @@3. YAO Kai-An, WANG Na, ZHAO Bin, CHENG Jiong-Jia, NI Hai-Yan, YANG Zheng-Biao, SUN Cheng, BI Shu-Ping. ChineseJ. Inorg. Chem., 2007, 23(6): 981～986 姚开安，王娜，赵斌，程炯佳，倪海燕，杨正标，孙成，毕树平.无机化学学报，2007，23(6)：981～986 @@4. XI Ling-Ling, SHI Qing-Zhao. Chinese J. Anal. Chem. , 2001, 29(12): 1457～1460 习玲玲，施清照.分析化学，2001，29(12): 1457～1460 @@5. WEI Su-Zhen, FAN Hui, GAO Su-Zhen. J. Hebei Med. Univ. , 1984, (1): 7～8 魏素珍，范慧，高素珍.河北医科大学学报，1984，(1): 7～8 @@6. Li Y S, Ju X, Gao X F, Zhao Y Y, Wu Y F. Anal. Chim. Acta, 2008, 610(2): 249～256 @@7. Zhao Y Y, Gao X F, Li Y S, Ju X, Zhang J, Zheng J. Talanta, 2008, 76(2): 265～270 @@8. LI Yong-Sheng, YANG Wei, LI Qiao-Jing, ZHOU Lang, GAO Xiu-Feng. Chinese J. Anal. Chem. , 2011, 39(7): 1058～1064 李永生，杨微，李乔婧，周朗，高秀峰.分析化学,2011，39(7): 1058～1064 @@9. LI Yong-Sheng, GAO Xiu-Feng. Spectroscopy and Spectral Analysis, 2007, 27(8): 1565～1569 李永生，高秀峰.光谱学与光谱分析，2007，27(8)：1565～1569 @@10. Li Y S and Gao X F. Anal. Chim. Acta, 2007, 588(1): 140～146 @@11. Li Y S, Liu W P, Ga