碱性蛋白酶Alcalase水解双低菜籽分离蛋白及产物抗氧化特性研究.pdfVIP

油脂工程·技术 碱性蛋白酶AIcaIase水解双低菜籽分离蛋白及产物抗氧化特性研究 张寒俊 周俊梅 刘大J (武汉工业学院) 【摘要】以双低菜籽分离蛋白为原料，用碱性蛋白酶Alcalase进行酶解，加酶量为18~104U／ g，酶解时间为7h，酶解温度为50℃，酶解液的pH值8．0，底物浓度为3％1t~，其菜籽分离蛋白 水解度达32．51％，氮收率达91．28％，并对产品蛋白活性肽的抗氧化特性进行了分析。 【关键词】双低菜籽分离蛋白；酶水解；双低菜籽蛋白肽；抗氧化特性 中图分类号：TS222．1 文献标识码：A 文章编号：1673-7199(2007)12-0077-04 科学证实．天然蛋白质经水解后所产生的多肽具 心分离，得到蛋白质浸提液，调节蛋白质浸提液的pH 有免疫调节、激素调节、降血压、降血脂、抗疲劳、 值为4．0。酸沉，离心分离，收集沉淀物，即得到双低 抗氧化等生理调节功能，而这些功能不被母体蛋白质 菜籽分离蛋白。 所代替。是当前国际医药学、食品界最热门的研究课 表 1 原料主要成分表 题和极具发展前景的功能因子。虽然国内外对植物蛋 白活性肽的研究已经达到一定水平。但主要为大豆活 性肽产品，而对于菜籽活性肽的研究才刚刚起步，相 关产品甚少．无法满足食品工业需求。 油菜籽是我国重要的油料作物之一，也是重要的 蛋白质资源。菜籽饼粕中蛋白质含量丰富，营养价值 与脱脂豆粕不相上下，其生物效价和利用率甚至超过 脱脂豆粕。目前中国农科院油料作物研究所已培育出 一 批硫甙小于45~mol／g，芥酸小于5％的双低油菜籽优 良品种，在湖北省的种植面积已达70％，这就为开发 1_2 试剂 利用菜籽蛋白资源创造了良好的条件。 药品：盐酸、浓硫酸、氢氧化钠、柠檬酸、硝酸、 本课题旨在利用双低菜籽蛋白资源，以双低菜籽 乙醇、磷酸氢二钠、硼酸、硫酸钾、三氯乙酸、磷酸 分离蛋白为原料，用蛋白酶对其进行水解制备得到菜 二氢钾、高氯酸、无水乙醚、钨酸钠、偏钒酸铵、硫 籽蛋白活性肽产品，并对产品的抗氧化特性进行分 酸铜、磷钼酸、钼酸铵、单宁酸、EDTA、酒石酸钾 析。 钠、邻二氮菲，以上试剂均为分析纯；指示剂：酚酞、 甲基橙、次甲基蓝；酶制剂：碱性蛋白酶Alcalase，由 1 材料与方法 诺维信生物技术有限公司提供。 1．1 原料 1．3 仪器设备 由中国农科院油料研究所提供 “中双7号”双低 奥立龙868型酸度计、微量凯氏定氮仪、80—2离 油菜籽，经脱皮、脱脂制成脱脂粕粉 (80目)。将双低 心沉淀器 (江苏省金坛市医疗仪器厂)、LD5—10型离 菜籽粕按一定比例加水，用NaOH调pH值，浸提，离 心机 f=jE京医用离心机厂)、ALPHA2—4型冷冻干燥机 技术·油脂工程 (德国CHRIST公司)、Cary 50型紫外分光光度计 (美国 的增幅减慢，逐渐趋向于水平。 Varian仪器公司)、Cary Eclipse型荧光分光光度计 (美 2．2 底物浓度对双低菜籽分离蛋白水解度和氮收率的 国Varian仪器公司)。 影响 1．4 检测方法 在pH值8，加酶量9xl04U／g，酶解温度5O℃，酶 (1)水分测定方法，GB 13101—1991；粗脂肪测