组织块法培养兔主动脉平滑肌细胞.pdfVIP

J， Lic兰孝l薹雩院雩报 2008Dee．29(6) aoningMedicalUnivemity- ’ 组织块法培养兔主动脉平滑肌细胞 王青青，李伟宏，常志杰，焦金菊 (辽宁医学院生理学教研室，辽宁锦州121000) 摘要：目的 探讨培养兔主动脉平滑肌细胞的方法，为心血管疾病的病因机制研究提供有用的体外模型。方法 采用 组织块贴壁、反转干涸方法培养兔主动脉平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下进行形态学观察及免疫细胞化学鉴定。结果 成功培养兔血管平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下细胞呈典型的 “峰一谷”状。免疫细胞化学染色呈棕黄色，均呈阳性表 达，胞浆内可见纵行排列肌丝。结论 利用组织块贴壁、反转干涸方法成功进行兔主动脉平滑肌细胞原代培养，具有简便 易行、培养周期短、纯度高等优点，是心血管疾病良好的体外研究模型。 关键词 ：血管平滑肌细胞；原代培养；兔 中图分类号：R543 文章标志码：A 文章编号：1674—0424(2008)O6一o545—03 TheTissueExplantsAdherantMethodforCultureofRabbitArterialSmoothMuscleCells WANGQingqing，LIWeihong，CHANGZhijie，JIAOJinju (DepartmentofPhysiology，LiaoningMedicalUniversity，Jinzhou121000China) Abstrct：Objective Todiscussthemethodforprimarycultul~ofrabbitarterialsmooht musclecells．To provideusefulvitro modelfortheetiopathogenisisofcardiacvasculardiseases．Methods Rabbitarterial smoothmusclecellswereculturedwithtissueex— plantsadherentandbacktorolldepletivemehtodnadcouldbepassagde．Theformofrabbitarterialsmoothn／usclecellswereobserved underinvertedphasecontrastmicroscopenadwereidentifiedwiht themethodofimmunocyotchemistry．Results Rabbitarterial smooth muscleceilswereculturedsuccessfullywiht tissueexplnatsadherentnadbacktorolldepletivemethod andcouldbepassaged．Under invertedphasecontrastmicroscope，thegrowthof thecellsshowedatypical hill—and—vallypattern．Afterimmunocytochemistrystai— ning．allthecellscytoplasm werestainedandpositive．Lotsof stainedbuffyactinfilamentbun dleswereobservedincellcytoplasm． Conclusions Th eculturetecheniqueof tissueexplantsadherentmehtodhastheadvnatagesofeasytooperate．hishefficiencytOob— tainVSMCsinashortercycletime，highpurityandSOon．Theyaregoodvitromodelofcardiacvasc~ra~seases． Keywords：VSMCs；primaryculture；rbabit 近年来，越来越多的证据表明血管平滑肌细胞 1．5kg，由辽宁医学院实验动物中心提供。 (vascularsmoothmusclecells，VSMCs)增殖在冠 1．1．2 培养材料和试剂 高糖 DMEM培养液， 状动脉粥样硬化、高