分光光度法测定大曲糖化酶活力探讨 - 中国酿造.pdf

2008年第17期 中 国 酿造 分析与检测 总第194期 ·69· 分光光度法测定大曲糖化酶活力探讨 马歌丽，，魏泉增1，张志刚2 (1．郑州轻工业学院食品与生物工程学院，河南郑州450002；2．洛阳伊龙药业有限公司，河南洛阳417300) 摘要：采用分光光度计法测量了大曲的糖化酶活力。结果表明，糖化酶水解淀粉产生的葡萄糖与3。5-二硝基水杨酸(DNS)反应生 成的棕红色3．氨基．5硝基．水杨酸，在波长520mn处的光吸收强度与糖化酶活力呈正比。 关键词：分光光度计；大曲：糖化酶活力：测定 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：0254—5071(2008)17—0069—02 Determinationofthe DNS glucoamylaseactivityofDaquby MAGelil，WEI Quanzen91，ZHANGZhigan92 ofFoodand Industry,Zhengzhou450002,China； (1．Department Bioengineenng,ghengzhouUniversityofLight 2，Luoyang Abstract：The in wasdetermined resultsshowedthattheabsorbanceof activityofglucoamylaseDaqu byspectrophotometer．The fromthe and acid,whichwasformed reactionof ofstarch acid, icylic glucoseproducedbyhydrolysisgranulesbyglucoamylase WaS tothe at520nln．Themethodcould determinethe duetoits proportionactivityofglucoamylase quickly activityofglueoamylascsimpleprocess． Key activity；determination words：spectrophotometer；Daqu；glucoamylase 大曲中的微生物群比较复杂，主要有霉菌、酵母菌和 确测定大曲糖化酶活力的方法。 细菌等，这些微生物可以分泌很多胞外酶，真正起糖化作 1材料与方法 1．1仪器与材料 用的是葡萄糖淀粉酶(Glucoamylase，EC3．2．1．3)简称糖化 酶【“，是一种外切型糖苷酶，它从淀粉的非还原性末端依 HH．$24数显恒温水浴锅：金坛市大地自动化仪器四 次水解ot．1，4糖苷键，切下一个个葡萄糖单元，并像B．淀厂；721可见光分光光度计：上海箐华科技仪器有限公司； 粉酶一样，使水解下来的葡萄糖发生构型变化，形成B—D一 葡萄糖。当遇到支链淀粉的分支点时，它也可以水解Ot一1， 产；3，5．二硝基水杨酸；乙酸一乙酸钠缓冲溶液(pH4．6)； 6糖苷键，由此将支链淀粉全部水解成葡萄糖。糖化酶也 可溶性淀粉：NaoH；化学试剂均为分析纯。 能微弱水解仅．1，3糖苷键，它一般都能