从母系遗传及表观遗传学来研究肾阴虚型慢性再生障碍性贫血的发病机制.pdfVIP

提 任石 3 ( 目的 : 研 究 肾阴虚 型慢 性 再 生 障碍 性 贫血 (C A A) 患者 线粒 体 突变情 况 和骨髓 中 ID 4基 因启动 子 区 甲基 化 状 态 ，探 讨 母 系遗传 的本 质— 线粒体和 表观 遗 传 学与 肾阴 虚 型慢性 再 障发生 、发展 的关 系 ，以期进 一 步研 究慢 性 再 障 的发病 机制 。方法 : 收集 8例 诊 断 明确 的 肾阴虚 型C A A 患者骨 髓 和 口腔 勃膜 上 皮 ，另收集2例 健康 人骨 髓做 正 常 对 照 (仅 用 于 ID 4基 因启动 子 区 甲基 化 的对 照 )，提 取D N A 。应 用 甲基化特 异性 聚合 酶链 反应 (M S一PC R) 检 测 ID 4基 因启动 子 区 甲基化 状 态 ;进 行线粒 体D N A 的全测序 ，在 骨髓 标本 中与剑桥 序 列 不一 致 的位 点再与 同一 患者 的 口腔 上皮 正常组织 的序 列 比较 ， 若此位 点 的变 化在 口腔 上 皮 组 织 中未 出现 ，则 定义 为 突变 ; 若 在骨 髓 标 本和 口腔上 皮 中均 出现 ，则 定 义 为 多态 。从 中西 医两 种 医学 的母 系遗 传 角度 探讨 其 发病 机 制 ，并对 结果进行 分 析 。结 果 : (l) 线 粒 体 全 测 序 表 明许 多 患者 的突变 位 点发 生 在 与 线 粒 体 氧 化 呼 吸链 密 切 相 关 的 区域 ，涵 盖 了N D I一5 、N D 4L 、A T P 6 、C Y T B 等 多个 线 粒 体D N A 的编 码 基 因 。而 很 多 的D N A 多态 乍L则 位 于D 一foop 区 。 (2 ) 8名C A A 患 者 均 检 测 到 了ID 4 基 因 的 甲基 化 。结 论 : (l) 线 粒 体 呼 吸链 酶 复 合 体 表 达 水 平 的改变 ，可 能 导致 线 粒 体 呼吸链 氧 化 磷酸 化 解 偶 联 、 “电子 漏 ”产 生R O S 引起 氧 化 应 激 和 能 量代 谢 障碍 ，这 些 变 化共 同参 与造 血 干 细 胞 衰 竭 的发 生 发 展 过 程 。因此 ，线 粒 体 基 因突 变 导 致 的呼 吸 链 功 能 障碍 可 能在 慢 性 再 障 的发 病 过 程 中起 重 要 作 用 。(2) 在 所 有 患者 骨 髓 细 胞 中均 检 测 到 了ID 4 基 因 甲基 化 ，表 观 遗 传 学 在 C A A 的发 病 机 制 中起 到 一 定 的作 用 ，有 助 于 慢 性 再 障发病 机 制 的进 一 步 研 究 。(3) 本 研 究从 中西 医 的 肾虚 和 母 系遗 传 、表 观 遗 传 学两 个方 面 初 步探 讨 了慢 性 再 障 的发 病 机 制 ，在 国际上 尚未 见 到类 似 研 究 ，意 义重 大 。 关键 词 慢 性 再 生 障碍 性 贫 血 ; ’肾主骨 生髓 ;线粒 体 ;母 系遗 传 ;ID 4 基 因 ;D N A 甲基 化 F r o m th e m a ter n a l g en etic a n d eP ig e n e tic s to stu d y th e P a th o g en esis o f ch r o n ic a P la stic a n em ia su ffe r fr o m ki d n ey y in d efie ien cy S P e c ia l: In terua l M ed ic i一ie o f Ixltegrated T C M an d W e stern M ed iein e S tu d en t :C u iX in g Tu to r :P ro f.X u R u iro n g A b stT a C t o b jeetive :T h i