固本健脑法对AD细胞模型的作用和Caveolin-1、P-tau影响的研究.pdf

目 录 中文摘要I ABSTRACT VI 缩略词表XIII 前 言1 实验一 新生大鼠海马神经元的原代培养 4 1.实验材料4 2.实验方法5 3.实验结果10 4.讨论13 4.1 原代培养方法的选择13 4.2 原代培养方法的优化14 4.3 小结 15 实验二 海马神经元的鉴定 16 1.实验材料16 2.实验方法17 3.实验结果23 4.讨论24 4.1 鉴定指标的选择 24 4.2 小结 25 实验三 pEGFP-C1-CAV1 质粒构建与表达 27 1.实验材料27 2.实验方法28 3.实验结果33 4.讨论38 4.1 真核表达载体的选择38 I 4.2 转染方法的选择 39 4.3 转染条件的优化 40 4.4 小结 41 实验四 shRNA-CAV1 慢病毒构建与表达 42 1.实验材料42 2.实验方法42 3.实验结果46 4.讨论50 4.1 shRNA 的选择 50 4.2 病毒载体的选择 51 4.3 小结 51 实验五 含药血清的制备及 AD 细胞模型评价 53 1.实验材料53 2.实验方法54 3.实验结果57 4.讨论59 4.1 含药血清浓度的选择59 4.2 AD 细胞模型的选择 60 4.3 小结 61 实验六 固本健脑法对海马神经元CAV-1、p-Tau 水平的影响 62 1.实验材料62 2.实验方法62 3.实验结果63 4.讨论68 4.1 CAV-1 与AD 的联系 68 4.2 小结 69 实验七 固本健脑法对AD 细胞模型 CAV-1、p-Tau 水平的影响 71 1.实验材料71 II 2.实验方法71 3.实验结果72 4.讨论77 4.1 Tau 蛋白磷酸位点的选择77 4.2 GSK-3 β与p-Tau 及 CAV-1 的联系 78 4.3 小结 79 讨 论81 1.中医学对老年性痴呆的认识81 1.1 病因病机的认识 81 1.2 中医药治疗概况 82 2.现代医学对阿尔茨海默病的认识 83 2.1 发病机制的认识 83 2.2 现代医学治疗概况 83 3.固本健脑法防治 AD 的理论依据 84 3.1 痴呆的基础变化是正虚84 3.2 痴呆的病机是脾肾亏虚84 3.3 固本健脑治法的提出及处方依据86 3.4 “固本健脑”之“本”的涵义87 4.固本健脑法对AD 细胞中 Tau 蛋白过度磷酸化的抑制作用 88 5.固本健脑法对AD 细胞中 CAV-1 的影响 88 6.GSK-3 β可能在固本健脑法通过CAV-1 保护神经过程中发挥作用 89 7.课题研究展望 90 8.课题创新之处 90 结 论91 参考文献92 文献综述 103 在校期间参与的课题与论著 103 致 谢 110 III IV 中文摘要 目的 伴随社会老龄化问题日益加剧，阿尔茨海默病（AD）已成为全世界共 同关注的议题，其患病率、发病率的上升与年龄的增长成指数关系，而其 高患病率不仅影响患者的生理、心理和经济，并且也影响医护人员、患者 的家属与朋友、医疗卫生体系和整个社会。因此，加强研究AD 的病因、 发病机制，探索有效的防治方法与药物，有着非常重要的临床价值和现实 意义。本课题旨在论述 AD 基本病因病机的基础上，探讨AD