转基因番茄口服疫苗的研究进展 - 中国医药生物技术.pdfVIP

中国医药生物技术 2010 年 2 月第 5 卷第 1 期 Chin Med Biotechnol, February 2010, Vol. 5, No. 1 57 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.01.013 ·综述· 转基因番茄口服疫苗的研究进展 郑卿，郭书巧，葛才林，倪万潮 第 1 例转基因烟草表达链球菌变异株 SpaA （surface 品方面做了广泛的尝试，多种外源基因已经成功转入番茄， [1]，开启了利用植物 [4-8]证明，这些转基因番 protein antigen A ）蛋白疫苗的成功研制 并表达出有效的蛋白质，小鼠实验 [2] 表达动物病原抗原蛋白的新纪元。1992 年，Mason 等 提 茄表达的蛋白可以引起有效的免疫反应，取得了可喜的成 出了“转基因植物疫苗”的概念，标志着植物口服疫苗成为 果，研究较多的番茄口服疫苗主要有以下几种：乙肝病毒疫 新药研发新途径的全面展开。 苗、口蹄疫病毒疫苗、霍乱弧菌疫苗、狂犬病病毒疫苗、呼 口服转基因植物疫苗不仅能诱导机体产生全身性的体 吸道合胞病毒疫苗等。 液免疫和细胞免疫应答，还能同时激活黏膜免疫。口服疫苗 2.1 乙肝病毒转基因番茄口服疫苗 到达肠内黏膜诱导部位之前经过胃内的不利环境时必须受 乙肝病毒（hepatitis B virus ，HBV ）是引发严重慢性肝 到保护，否则有可能被降解而失去免疫原性。而植物细胞壁 炎的病原，目前乙肝病毒疫苗的获得是利用酵母细胞通过发 作为天然的生物胶囊，可保护细胞内的疫苗免受消化道酸性 酵途径产生的，属于生物技术产物下的亚单位疫苗。HBV 在 环境和各种酶的降解，使表达的疫苗在小肠内缓慢释放，被 肝 DNA 病毒家族中属于双链 DNA 病毒。HBV 基因组包 小肠上皮的 M 细胞（membrane cell ）识别并转运，APC 括四个基因：pol 、env、precore 和 X ，分别编码病毒的 DNA （antigen presenting cell ）细胞加工递呈，使机体产生黏膜和 聚合酶、外壳蛋白、前核心区蛋白和 X 蛋白。乙肝病毒表 全身性的免疫反应，发挥对机体的全面保护作用[3] 。因此， 面抗原（hepatitis B virus surface antigen ，HBsAg ）的主要成 利用植物作为抗原表达和递送的载体已经成为当今生物 分蛋白即是由 env 基因编码的 S 蛋白。由于 HBsAg 颗粒 [9] 技术研究的热点，并取得了长足的发展。但是食物的加工 可以使人体产生专一的抗体，能对病毒的感染起预防作用 ， 对目标蛋白有一定的破坏，并可能影响其免疫原性。番茄 因此科学家在进行疫苗研制时都将编码乙肝病毒表面抗原 （Lycopersicon esculentum ）作为具备良好加工特性的蔬菜， 的基因作为研究的重点。 具有全世界的普及性，其口感好，营养丰富，是植物口服疫 Shchelkunov 等[4]将表达人免疫缺陷病毒（human 苗的理想载体。因此，番茄作为生物反应器来生产可食性疫 immunodeficiency virus，HIV ）的表位 ENV 、GAG 和编码 苗具有较好应用前景。 HBsAg 的基因融合，以 CaMV35S 为启动子构建载