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海峡药学 2008年 第20卷 第 10期
· 实验研究 ·
培养基中氮源对胀果甘草细胞悬浮培养生产黄酮类化合物的影响
高艳丽,高山林 ,焦小珂,张晓霞,吴 炯 (中国药科大学 南京 210038)
摘要: 本文研究了培养基中硝态氮与铵态氮的比例及氮源总量的改变对胀果甘草(GlycyrrhizainflataBata1.)悬浮培养细胞的生长量和细胞
内黄酮类化合物含量的影响。结果表明。当MS培养基中其他成分不变.NO;/NH4~摩尔浓度之比为 50:10,氮源的总量为 80mmol·L_。,此时获
得最大的细胞生长量 15.02g·LI1;以铵盐为唯一氮源,总量为40mmol·L一1,此条件下细胞 内黄酮类成分含量最高,达 16.74mg·g一1o在此基础
上进行了两步悬浮培养方法的研究,使甘草黄酮产量达到每升培养基212.00rag,为对照的3.64倍。
关键词:胀果甘草;氮源;黄酮类成分;两步培养
中图分类号:F404.4 文献标识码:A 文章编号:1006.3765I2008)一010.0136.04
Effectofnitrogen source onthe productionofflavonoidsby suspension
cellcultureofGlycyrrhizainflata Batal
GAOYan—li,GAOShan-lin ,JIAOXiao-ke,ZHANGXiao-xia,WUJiong(ChinaPharmaceuticalUniversity,Nan-
jing210038,China)
ABSTRACT: Theeffectsofnitrate-nitrogentoammonium—nitrogenratioandtotalamountofnitrogen onthe
cellgrowthandflavonoidsaccumulationbysuspensioncellcultureofGlycyrrhizainflataBatalwereinvestigat—
ed.Themaximum biomassof15.02g·I一 wasachievedwhen initialnitrogenconcentrationwas80mmol·I一。
withNO3-/NH4+molarratioof50:10;themaximum flavonoidsconcentrationof16.74mg·g一 wasachieved
whenammonium asthesoleN sourceandinitialnitrogenconcentrationwas40mmo卜L。。.A two.stageflaskcul—
turesystem wasestablishedbasedontheeffectsofnitrogenandtheproductionofflavonoidsreachedto212.00mg
· L~ whichwas3.64timesofthemaximum productionofsingle—stageprocessculture.
KEYWORDS:GlycyrrhizainflataBatal;Nitrogen;Flavonoids;Two-stageprocess
胀果甘草 (GlycyrrhizainflataBata1.)为豆科 (Legumi— 规模细胞培养生产甘草黄酮类成分成为一种有效的方法。本
nosae)甘草属 (Glycyrrhiza)植物,是我国药典记载的3种药用 实验通过探索培养基中氮源对细胞生长和黄酮积累的影响,
甘草之一。甘草为中国最常用的传统中药材之一.味甘性平, 改变硝态氮和铵态氮的比例及氮源总浓度,分别筛选出最适
有补益脾气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛。调和诸药等功 合细胞生长的生长培养基和适合黄酮类化合物积累的生产培
用。甘草属植物中含有多种化学成分,其中公认的有效药用 养基,在此基础上建立了两步悬浮培养系统,显著提高了甘草
成分主要为三萜类和黄酮类化合物。其中甘草黄酮类成分具 黄酮的产量。
有抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、保肝等多种药理作用 1【],甘 1 材料和方法
草黄酮的美自防晒功能已得到广泛认可,并作为天然美白成 1.1 材料与试药 甘草种子于2004年购 自河北安国药市,随
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