人呼吸道合胞病毒减毒活疫苗培养的初步探索.pdfVIP

698 实用预防医学 2008年6月 第15卷 第3期 Practical Preventive Medicine，lun．2008，Vol 15，No·3 文章编号：1006 3110(2008)03—0698—05 【论 著 】 人呼吸道合胞病毒减毒活疫苗培养的初步探索 李志强，陈 巍，李 华，龙润乡，沈 冬，杨丽仙，张云昆，谢忠平 摘要： 目的 对比人呼吸道合胞病毒(humrdn respiratory syncytial virus，HRSV)经人二倍体KMB17细胞低温传代前 后对动物的病理损伤，分析毒力变化情况。 方法 将 HRSV A2株病毒接种到人二倍体 KMB- 细胞进行低温培养传 代，接种原代病毒(5．37 Lg CCID 。／m1)至乳鼠脑内，14 d处死解剖，取脑、心、肺作病理切片检查；选择原代、第6代、第11 代低温传代病毒接种豚鼠鼻腔，于第7 d、第14 d分2批分别处死，取心、肝、脾、肺、肾组织作病理切片检查，并取肺组织分 离病毒、进行感染性滴度测定、用间接免疫荧光法对其进行鉴定。 结果 经脑内接种的乳鼠均未死亡，且乳鼠的脑、肺 HE染色切片与对照组相比均无明显著差异。豚鼠经鼻腔接种，接种原代病毒组第14 d处死时体重明显较对照组轻，6代 组和11代gtNxCNgt接近；3组病毒均引发豚鼠间质性肺炎；3组豚鼠肺组织分离的病毒滴度差异不大，平均为 4．o Lg。 结论 乳鼠脑内接种HRSV不能导致死亡，脑组织不是HRSV的病变靶器官；HRSV经鼻腔接种豚鼠能引起强烈的肺 部感染，豚鼠可作为HRSV毒力评价的动物模型；HRSV在KMBi 细胞上经低温传11代，接种豚鼠仍能引起间质性肺炎， 未出现明显的减毒株特征，还需要进一步减毒。 关键词： 人呼吸道合胞病毒；冷传代；动物模型；间质性肺炎 中图分类号：R373．1 文献标识码：A Preliminary Study on Culturing Cold—passaged Human Respiratory Syncytial Virus LI Zhi—qiang，CHEN Wei，LI Hua， el；a1．(Institute of Medical Biology，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Kunming 650118，Yunnan) Abstract： Objective To analyze the virulence alteration of RSV A2 after being cold—passage cultured in animal mod。 e1． Methods The HRSV A2 strain was cultured and passaged in the humanI diploid cell KMB17 at Iow tem perature．The pri- mary virus(5．37 LgI COlD50／m1)was inoculatedl into the brain of sulking mouse，and the pathology of heart，brain，and lung ti- ssue was examined on the 14th day．The primal，the 6th and the 1lth passaged vi ruses were used to inoculate into guinea— lpigs．The pathology of heart，liver，spleen，lung，and lkidney tissue was examined on the 7th and the 14th days．Virus from the lung tissue of guinea—pigs was isolated and detected withI IDIF and their t