应用小鼠替代仔猪检验仔猪水肿病灭活疫苗效力研究.pdfVIP

畜牧与兽医 2008年 第4O卷 第8期 应用小鼠替代仔猪检验仔猪水肿病 灭活疫苗效力研究 苗玉和 ，舒秀伟 ，陆承平 (1．南京农业大学动物医学院，江苏 南京 210095； 2．辽宁益康生物制品有限公司，辽宁辽阳 111000) 摘要：用小鼠替代仔猪进行仔猪水肿病灭活疫苗效力检验，结果表明，疫苗免疫小鼠能达9／10保护的最小免疫剂量是0．05mL／只 (4×10 CFU)，免疫仔猪能达5／5保护的最小免疫剂量是 1．5mL／头 (1．20×10 CFU)。用疫苗0．O1mL免疫小鼠所产生的抵抗致死量强毒菌的免疫力， 相当于用疫苗 1．0mL免疫 14～l8日龄仔猪所产生的抵抗致死量毒素静脉注射的免疫力；用疫苗0．05mL免疫小鼠所产生的抵抗致死量强毒菌的 免疫力，相当于用疫苗 1．5mL免疫 14～18日龄仔猪所产生的抵抗致死量毒素静脉注射的免疫力。疫苗0．05mL免疫小鼠可以替代仔猪作为效力 检验的模型。 关键词：仔猪；水肿病；小鼠；灭活疫苗；效力检验 中图分类号：$858．28 文献标识码：B 文章编号：0529~130(2008)08—0069—02 仔猪水肿病 (edemadisease，ED)是 由产志贺 1．2 实验室产品的制备 毒素大肠杆菌 (ShigatoxinEscherichiacoli，STEC) 将经过繁殖鉴定合格的二级种子接种于配制好的 引起的一种急性、致死性疾病，以发病突然、头部水 培养基中，菌液培养结束后，加人甲醛溶液灭活，将 肿、共济失调、惊厥和麻痹为主要特征。剖检可见皮 检验合格的C83684、C83905、C83527菌液等量混 下、胃壁和肠系膜显著水肿，全身淋巴结水肿等。主 合，然后加入氢氧化铝胶和硫柳汞溶液，搅拌后抽样 要发生于断奶 2周左右的仔猪，发病率虽然只有 检验合格后分装。 10％～30％，但致死率可高达80％～100％。该病实 1．3 茵体裂解物 (内毒素)制备 质是一种肠毒血症 (如 F18)，细菌依靠其黏附素菌 按参 考 文 献 [3—4]进 行。将 C83684、 毛在小肠定居和繁殖，产生Stx2e。当毒素被肠道吸 C83527、C83905的菌种分别接种于普通琼脂固体培 收后，可在不同组织器官引起血管内皮细胞损伤，改 养基表面，36～37℃培养 18h，用适量的生理盐水 变血管通透性，导致病猪出现水肿和典型的神经症 洗下菌苔。测定菌数后将不同细菌含量的菌液反复冻 状 J。防治本病 目前主要采取加强饲养管理及对症 融 10～20次，然后以4000r／min离心30min，其上 治疗的综合性措施，但治愈率不高。由于本病的致死 清液主要含内毒素，经无菌检验合格后，置 一2O℃ 率高，所以疫苗免疫已成为防控本病最经济、有效的 贮存备用。 途径之一。 1．4 实验室产品最小免疫剂量测定 常见的引起仔猪水肿病的大肠杆菌的血清型主要 1．4．1 实验室产品对小鼠的最小免疫剂量测定 为0139、O138、0141_2J，从中国兽医药品监察所选 取 16～18g清洁级昆明系小鼠 (购 自中国医科 择对应上述血清型的菌株C83905、C83684、C83527， 大学实验动物中心)60只，随机分为6组，每组 10 研制成功用于预防仔猪水肿病的灭活疫苗。在疫苗研 只，分别皮下注射 001批疫苗 0．0l，0．05，0．10， 制过程中，应用小鼠替代仔猪用于检验疫苗效力，取 0．15和0．20mL／只，另 l0只作对照。10d后连同对 得了良好的效果。 照小鼠，分别腹腔注射强毒混合菌液0．2mL (含