高脂饲料加速阿霉素肾小球硬化模型的建立.pdf

维普资讯 南京中医药大学学报2OO7年5月第23卷第 3期 JOURNALOFNANJINGTCM UNIVERSITYVof．23 Ⅳ0．3Mar．2OO7 高脂饲料加速阿霉素肾小球硬化模型的建立 陈继红 ，孙伟 ，高坤 ，周栋 ，刘丽 ，赖仁胜 ，朱萱萱 (南京中医药大学第一临床医学院，江苏 南京 210046；南京中医药大学附属医院，江苏 南京 210029) 摘要：目的 建立局灶节段性肾小球硬化动物模型。方法 对 sD大鼠行右肾摘除术，分2次尾静脉注射阿霉素，每 次 3mg／kg，并喂饲高脂饲料。结果 该模型表现为浮肿、大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症；病理学检查、计算机图像分析 及免疫组织化学染色显示，肾小球主要表现为系膜基质增加，肾小球 出现局灶节段性硬化，细胞外基质 FN、CoLIV表达上 调。结论 本模型为研究慢性肾小球疾病的机制及治疗创造了条件。 关键词：肾小球硬化；动物模型；阿霉素；高脂饲料；大鼠 中图号：R692．31 文献标识码：A 文章编号 ：1000—5005{21307)03—0161—03 肾小球硬化动物模型是研究慢性肾小球疾病 腹腔，剥离肾脏脂肪包膜 ，关闭腹腔，缝合切 口。 进行性发展和慢性肾功衰竭的基础工作之一。我 术后青霉素 G肌肉注射 3d，2万U／只鼠。d7给 们参照文献，在以往研究的基础上，对阿霉素肾病 予阿霉素3mg／kg尾静脉注射，d21重复尾静脉 模型进行了改造，建立了伴有高脂血症的局灶性 注射阿霉素3mg／kg，假手术组注射相应量的生理 阶段性肾小球硬化模型。 盐水。第 12周处死大 鼠。 1 实验材料 3 结果 动物 ：选用健康雄性sD大鼠30只，体质量为 3．1 一般表现 200 220g，由南京江宁青龙山动物实验中心提 注射阿霉素后d4，模型组摄食减少，出现不 供，合格证号：scxK2o010018；普通饲料适应性饲 同程度的腹泻，个别大鼠出现尿血、歪头反应 ，为 养 1周后，选取尿蛋 白定性阴性者用于实验。随 阿霉素的副作用所致。随着时间的推移，模型组 机分为假手术组6只，模型组 15只。 大鼠体质量下降，倦怠无力，精神萎靡，抓捕时无 高脂饲料 ：胆固醇2％，甲硫氧嘧啶0．2％，猪 反抗。第 5周模型组大鼠出现不同程度的腹水现 油 10％，全价颗粒饲料87．8％(玉米面30％，面粉 象 。 30％，麸子 35％，鱼粉 2％，骨粉 2％，食盐 1％)。 3．2 尿蛋 白定量 批号 ：o50826。 于第 4周、第 8周、第 12周将大鼠置于清洁 试剂：阿霉素系浙江海正药业股份有限公司 的代谢笼中，留取24h尿液，测尿量，尿标本离心 产品(国药准字 H33o21980)，规格为每支 10mg； 后测24h尿蛋白定量，结果见表 1。 Ⅳ型胶原蛋白(CoL1V)、FN(Fibronectin)单克隆抗 模型组从注射阿霉素第4周起尿蛋 白逐渐升 体购 自迈新公司。 高，明显高于假手术组 (P0．05)，以后持续升 2 造模方法 高，直至实验结束。 实验前用2％戊巴比妥钠 (0．1mL／100g鼠) 3．3 血液生化指标检测 从腹腔注入固定于手术台，消毒后，于右侧切 1 实验结束眼眶取血，全 自动生化检测仪检测 cm长小 口，切除右肾，保留肾上腺；假手术组打开 血胆固醇(CHO)、甘油三酯 (TG)、尿素氮(BUN)、 收稿 日期；2007—01—05：修稿 日期：2007—03—06 基金项 目：江苏省 自然科学基金项 目(BK2004162) 作者简介：陈继红(1975一)，女，河南焦作人，南京中医药大学2004级博士研究生。*通讯作者：E—mail：S