三突变型低氧诱导因子-1α基因对老年小鼠缺血下肢血管的新生效应.pdfVIP

广东医学 2016年7月 第37卷第 14期 GuangdongMedicalJournalJu1．2016，Vo1．37，No．14 ·2065 · 础 囊 三突变型低氧诱导因子 一1基因对老年小鼠缺血 下肢血管的新生效应 谢佳佳 ，李瑜辉’，唐其东 ，吴平生 ，宾建平 广东省第二人民医院心血管内一科(广州510317)；南方医科大学南方医院心血管内科(广州510515) 【摘要】 目的 探讨三突变型低氧诱导因子一1(HIF一1仅)基因对老年鼠缺血下肢的血管新生效应。方法 24只老年小鼠结扎一侧下肢股动脉制备下肢缺血模型并随机等分为3组，分别经肌肉注射生理盐水(NS)、腺 病毒包裹的B一半乳糖苷酶基因(Ad—LacZ)、腺病毒包裹的Pro402、Pro564、Asn803三位点突变型HIF一1ot基 因 (Ad—TM)。术前、术后O、7、14、2l、28d分别对小鼠双侧下肢骨骼肌行对比超声灌注成像评价缺血下肢骨骼肌的 血流情况(用缺血下肢血流量／对侧非缺血下肢血流量表示)。术后28d处死小鼠取下肢骨骼肌行免疫荧光染色 标记 Baudeirasimplificifolia—l凝集素(BS—llectin)评价微血管密度(用微血管／骨骼肌纤维表示)。结果 对比 超声灌注成像显示：术前双下肢血流量基本相等，术后0d3组的血流量均下降至 15％左右，3组之间差异无统计 学意义(P0．05)。随着时间的推移，3组的血流均有所恢复，其中，Ad—TM组的血流恢复快于其他两组，术后28 d，Ad—TM组 中缺血下肢的血流量达到对侧非缺血下肢血流量的(66．6±8．9)％，较NS组的(34．2±6．3)％和Ad — LacZ组的(35．7±5．4)％显著增加 ，差异有统计学意义(P0．01)。免疫荧光染色显示：Ad—TM组的微血管密 度1．06±0．10显著高于 is组O．36-40．04和Ad—LacZ组O．35±0．04，差异有统计学意义(P0．01)。结论 三 突变型HIF—l仪基因可有效促进老年鼠缺血下肢血管新生。 【关键词】 低氧诱导因子一1；对比超声；下肢缺血；血管新生 Angiogenieeffects oftheIIIF一1 withtriple—pointmutationsinhind—limbischemiainagedmice． XIEJia一 0 ，L，Yu—hui，TANGQi—dong，WUPing—sheng，BINJian～ping． CardiovascularDiv~ion，GuangdongNO．2 ProvincialPeoplesHospital，Guangzhou510317，China． Correspondingauthor：BNI ．1ian—ping：E—mail：sjianpingbin@126．corn A【bstract】 Objecti~e ToexploretheangiogeniceffectsoftheHIF一1 withtriple—pointmutationsinhind— limbischemiainagedmice．M ethods Twenty—fouragedmiceunderunilateralarteryligationwererandomlydivided into3testgroups，inwhichnormalsaline，adenovirus(Ad)vectorparticlescontainingthegeneforLacZ(Ad—LaeZ)， andHIF一1a402／564／803(triple—pointmutant，Ad—TM)wereintramuscularlyinjectedintotheischemiahindlimb， respectively．Serialcontrast—enhanceduhrasonicpeffusionimagingoftheproximaladductormusclesintheischemiaand contralateralnon—ischemiahindlimbswasperformed．OnDay28postoperatively，themusclespecimenswereharvested andthedensityofthecapillarieswasdeterminedbyimmunofluores