甲醛对大鼠脑组织超氧化物歧化酶和脑细胞DNA损伤影响的研究.doc

　　甲醛对大鼠脑组织超氧化物歧化酶和脑细胞DNA损伤影响的研究 【摘要】 目的 研究甲醛染毒对大鼠脑组织超氧化物歧化酶( SOD)和脑细胞DNA损伤的影响。方法 采用腹腔注射方式给大鼠染毒，15只大鼠随机均分为对照组(生理盐水)、低剂量甲醛组0.2 mg /kg(1/ 2000 LD50)、高剂量甲醛组20.0 mg/kg(1/ 20 LD50);每天1次，染毒7 d。染毒结束后，检测大鼠脑组织SOD的含量，利用单细胞凝胶电泳技术(彗星实验)检测脑细胞DNA损伤。结果 高剂量染毒组大鼠脑组织的SOD 的活力[(12.89±2.12)U/mg Pro]低于对照组[(16.34±2.68)U/mg Pro] (Plt;0.05) ;腹腔注射甲醛可导致脑细胞DNA片段断裂，高剂量甲醛组彗星尾巴明显长于对照组。结论 甲醛可使脑组织SOD 活力下降，造成脑细胞DNA 的断裂;甲醛对大鼠中枢神经系统具有一定的毒性作用。 【关键词】 甲醛;超氧化物歧化酶;DNA;单细胞凝胶电泳 　　【Abstract】 Objective To study the effect of formaldehyde on superoxide dismutase(SOD) in the cerebral tissues and DNA damage of brain cells of rats.Methods The rats in control group l/ 10 g,the rats in loaldehyde g/kg,once per day for seven days.Then SOD in the cerebral tissues age of the brain cells.Results The activity of SOD in high dose group [(12.89±2.12)U/mg Pro] shog Pro](Plt;0.05).Formaldehyde could significantly cause the break up of the DNA strands.The tail of et in high dose group aldehyde can decrease the activity of SOD in cerebral tissues, and cause break up of DNA strands.Formaldehyde has obvious toxic effects on central nervous system in rats. 　　【Key aldehyde，superoxide dismutase，DNA，single cell gel electrophoresis technique 　　甲醛存在于多种工业及民用产品中，是一种重要的环境污染物。甲醛对心血管系统、内分泌系统、消化系统、生殖系统、肾脏均具有毒性作用，并具有一定的遗传毒性和神经系统毒性。大量的流行病学研究显示长期接触甲醛可引起注意力不集中、神经衰弱、头痛、头昏等神经系统症状[1]，动物实验也提示甲醛可抑制中枢神经系统活动，导致神经行为功能异常，影响学习记忆。本实验采用腹腔染毒的方法，观察甲醛对大鼠脑组织超氧化物歧化酶( SOD) 活力和脑细胞DNA损伤的影响，为进一步证实甲醛的神经毒性提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 选择健康清洁级纯系大鼠30只，鼠龄7 周，体质量181～223 g，全部雌性，由山东绿叶制药股份有限公司实验动物中心提供，在屏蔽环境中进行饲养，饲养条件: 温度( 24±2) ℃，相对湿度( 55±10)%。 　　1.2 试剂与仪器 试剂：甲醛(AR 级，中国展望化工试剂厂)，超氧化物歧化酶( SOD) 测定试剂盒(南京建成生物工程研究所),蛋白酶K(上海浩然生物技术有限公司)， 正常熔点琼脂糖(上海化学试剂公司)，低熔点琼脂糖(德国Premega公司)，DAPI(中科瑞泰生物科技公司)，0.4%苔盼蓝溶液(美国Sigma公司)，其他试剂均为分析纯。仪器：荧光分光光度计(F4500，日本日立)，DYYⅢ型电泳槽(北京市六一仪器厂)，DYYⅡB 型三恒电泳仪(北京市六一仪器厂)，BH2 型荧光显微镜(日本OLYMPUS)，0.635 cm、450 万相素数码相机(日本Nikon)，三用电热恒温水箱(北京长源实验仪器厂)。 　　1.3 方法 　　1.3.1 动物分组与染毒：30只大鼠随机均分为对照组和高、低剂量染毒组，每组10只，全部雌性。采用腹腔注射方式给大鼠染毒，染毒组剂量分别为：低剂量甲醛组0.2 mg/kg(1/ 2000 LD50)和高剂量甲醛