ox-LDL 抑制大鼠骨髓间充质干细胞的体外增殖和Oct-4表达.pdfVIP

重庆 医学2014年 5月第 43卷第 14期 1737 论著 ·基础研究 OX—LDL抑制大鼠骨髓间充质干细胞的体外增殖和 Oct一4表达 吕铁伟 ，孙慧超 ，张 蕾 ，刘玲娟 ，吴晓云 ，刘晓燕 ，朱 静 ，刘振 国。，田 杰 (1．重庆 医科大学儿童 医院心血管 内科 ，重庆 400014；2．儿童发育疾病研 究省部共建教 育部重点实验室／ 儿科学重庆市重点实验 室／重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地，重庆 400014； 3．美国俄亥俄州立大学医学中心，哥伦布 43210) 摘 要 ：目的 以大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)为研究对象，在体外培养过程 中观察氧化低密度脂蛋 白(ox—LDL)对 MSCs 增殖、干细胞表面标志 Oct一4表达 的影响。方法 将体外培养 的MSCs分为 4组 ：对照组，不加任何干预因素 ；0x-LDL组，在培养 基 中分别加入不 同浓度 (1、5、10、20Fg／mL)的ox-LDL；OX_LDL+NAC组 ，采用抗氧化剂 乙酰半胱氨酸 (NAC)预处理后再加入 ox-LDL；阴性对照组，在培养基 中加入对应浓度的天然低密度脂蛋 白(nLDL)。在不 同培养时间点收集细胞计数并绘制生长 曲 线 ；蛋 白免疫 印迹法(Westernblot)检测干细胞特异表面标记 Oct一4表达水平；电子顺磁共振技术检测氧化活性产物 (ROs)产量。 结果 oX-LDL抑制 MSCs的增殖 ，浓度越大细胞增殖抑制越 明显，当浓度大于 5／,g／mL时细胞 出现凋亡 ，抗凋亡蛋 白Bct一2表达 水平减弱 ；ox-LDL干预后 Oct一4的表达水平显著减弱 ，且与干预浓度呈正相关 ；oX_LDL干预后 R0S的产量 明显升高，而 nLDL 对 R0s生成没有影响。结论 ox-LDL抑制MSCs的体外增殖和 Oct一4表达，可能与R0s增加有关。 关键 词 ：脂蛋 白类，LDL；骨髓 细胞 ；细胞增 殖；Oct一4 doi：10．3969／j．issn．167卜8348．2014．14．020 文献标识码 ：A 文章编号 ：167卜8348(2O14)141737一O4 oxidized low。density-lipoprotein inhabitstheproliferation andOct-4 expressofratbonemarrow mesenchymalstem cellsinvitro LvTiewei，SunHuichao ，ZhangLei，LiuLingJuan ，WuXiaoyun ，LiuXiaoyan ，ZhuJing ，LiuZhenguo。，TianJie (1．DepartmentofCardiology，theChildrensHospitalAffiliatedtoChongqingMedicalUniversity，Chongqing400014China； 2．KeyLaboratoryofChildrenDevelopmentandDisorderCo—foundedbyProvincialGovernmentandMinistryofEducation| KeyLaboratoryofPediatricsinChongqing／ChongqingScienceandTechnologyCooperationCenterSorChildDevelopment andDisorders，Chongqing 400014，China：3．TheOhioStateUniversityM edicalCenter，Columbus，Ohio43210，USA) Abstract：Objective Todetecttheeffectofox-LDLonself—renewalandOct一4expressofMSCsinvitro．Methods MSCscul— turedinvitroweredividedinto4groups：blankcontrol(noreagentsinculturesystem)，ox-LDL(1，5，10，20,／g／mLox-LDLwere addedintoculturesystem)，ox-LDL+NAC(corresponding