慢性肾衰竭模型中透明质酸和CD44对骨髓间充质干细胞归巢及修复作用的影响.pdfVIP

· 2103 · · 论 著 · 慢性 肾衰竭模型中透明质酸和 CD 对骨髓 间充质干细胞归巢及修复作用的影响 边晓慧，何 平，孙广萍，孙 立，李德天，冯江敏 摘【要】 目的 探讨慢性肾衰竭模型中透明质酸 (HA)与cD 的相互作用对骨髓问充质干细胞 (MSC)归巢 和修复受损肾脏能力的影响。方法 根据随机数字表法将32只雄性 sD大鼠分为：假手术组 (n=8)、模型组 (n= 8)、MSC组 (n=8)和MSC／抗CD 组 (n：8)。采用间隔1周的两步法建立大鼠5／6肾切除模型，假手术组只进行麻 醉和肾被膜剥离，而不进行肾切除术。第二次术后第 8周分别给予尾静脉注射 1×10／mlMSC、1ml磷酸盐缓冲液 (PBS)、1×10／mlMSC、1×10／ml抗 cD 抗体 OX50预孵的MSC。治疗4周后处死大 鼠，留取血标本和残。肾组织。 检测血肌酐和尿素氮水平；过碘酸雪夫 (PAS)染色和Masson染色后观察病理改变，应用肾小球硬化指数和肾小管问 质损伤指数来判定肾小球和肾小管间质损伤程度；免疫组化法观察残肾组织 中巨噬细胞和肌成纤维细胞的变化；免疫 荧光法追踪归巢的MSC；免疫组化法和免疫印迹法观察HA的表达；双荧光法观察MSC与HA的共定位关系。结果 与假手术组相比，模型组大鼠的血肌酐、尿素氮、肾小球硬化指数、肾小管间质损伤指数升高 (P0．05)，肾脏病理 改变主要为。肾小球肥大、局灶节段性肾小球硬化，炎性细胞浸润和肾间质纤维化，包括巨噬细胞和肌成纤维细胞数量 明显增加；与模型组相比，MSC组、MSC／抗 CD 组肌酐、尿素氮、肾小球硬化指数、肾小管间质损伤指数均降低 (P 0．05)。假手术组肾皮质几乎不表达HA，而模型组的肾皮质大量表达HA。免疫荧光法显示，治疗4周后 ，假手术组 未发现有归巢的MSC，MSC组的残肾组织中有较多的MSC，MSC／抗CD 组归巢的MSC减少。双免疫荧光结果显示较 多MSC归巢至HA表达丰富的区域。结论 HA和 CD 的相互作用影响MSC的归巢能力，但不影响MSC修复受损肾脏 的能力。 【关键词】 肾功能衰竭，慢性；骨髓问充质干细胞；透明质酸；CD ；归巢 【中图分类号】R692．5 【文献标识码】A doi：10．3969／j．issn．1007—9572．2014．18．012 边晓慧，何平 ，孙广萍 ，等 ．慢性肾衰竭模型中透明质酸和 CD 对骨髓间充质干细胞归巢及修复作用的影响 [J]．中国全科医学，2014，17 (18)：2103—2108．[WWW．chinagp．net] EffectofHyaluronicAcidandCD44onHomingand ImprovingRenalFunction ofMesenchymal Stem CellsinA Rat ChronicRenalFailureModelBIANXSao—hui，HEP ，SUNGuang-ping，eta1．DepartmentsofNephrology，theFirst AffiliatedHospitalofChinaMedicalUnwe~ity，Shenyang110001，China A【bstract】 Objective Toexploretheeffectofhyaluronicacid(HA)andCD“onthehomingandimprovingrenal funetionofMesenchymalStem Cells(MSC)inaratchronicrenalfailuremode1．Methods 32gradecleanadultmaleSDrats wererandomlydividedinto4groups：sham operationrgoup，renalfailurergoup，MSC group，MSC／anti—CD “rgoup，8 in eachgroup．Establishmentofratremnantkidneymodel：afteroneweekadaptivebreeding，allcutrightkidneyfirst，thencut2／ 3leftkid