洛阳地区无偿献血人群中疱疹病毒8型的检测.pdfVIP

广东医学 2012年 10月 第 33卷第20期 GuangdongMedicalJournal Oct．2012,Vo1． ! !： ．3117 · 洛阳地区无偿献血人群中疱疹病毒 8型的检测 冷弘 ，王媛媛。，燕备战。，方春霞 ，马晶。，臧文巧 ，李敏 ，赵国强。 洛阳职业技术学院免疫学与病原生物学教研室 (河南洛阳471000)；郑州大学基础医学院(郑州 450001)； 河南省人民医院输血科(郑州450003)；河南省洛阳市中心血站体采科(471000) 【摘要】 目的 了解洛阳地区无偿献血人群q-疱疹病毒8型(humanherpesvirus8，HHV一8)的感染情况。 方法 采用荧光定量PCR法检测外周血单核细胞中HHV一8DNA，同时采用ELISA方法检测血清中HHV一8抗 体。结果 480份无偿献血者标本血清中HHV一8DNA检 出率为6．7％(32／480)，HHV一8抗体检 出率为6．5％ (31／480)；HHV一8DNA和HHV一8抗体的检 出率有随年龄增加而增高的趋势。结论 洛阳地区无偿献血人群 中存在有一定比例的HHV一8感染者，建议对无偿献血者增加HHV一8感染筛查。 【关键词】 人疱疹病毒8型；无偿献血者；PCR；ELISA 人类疱疹病毒8型 (humanherpesvirus8，HHV一8) ReferenceDye111 L，模板 DNA4 L，去离子水补足 又称卡波肉瘤相关疱疹病毒 (KaposiSsarcomaassociated 50p,L；扩增程序：预变性95。I=30S，95℃ 3S、60℃30S herpesvirus)，属人类疱疹病毒 ^y亚科 。HHV一8被认 两温循环40圈。梯度稀释度含有 HHV一8扩增 目的 为是卡波肉瘤 (KaposiSsarcoma)的致病因子 ，除了与 基因片段的质粒DNA为标准品，以标本中含有大于 1 艾滋病相关还与多中心性卡斯特莱曼病 (multicenter 个 HHV一8DNA拷贝为阳性。 CastlemanSdisease)、原发渗出性淋 巴病 (primaryeffu— 1．4 ELISA检测 在96孔酶标板上分别设标准品孔 sionlymphoma)等多种疾病有关 J。流行病学调查结 和待测样品孑L，按照说明书要求加入不同稀释的标准 果 显示 ，HHV一8在相关疾病患者以外人群 中的感 品和待测血清标本 ，封板后置 37~(2温育 30min，洗涤， 染情况具有明显的地区差异，而我 国普通人群中HHV 加入酶标试剂 50 ，封板后置 37℃温育 30min，洗 一 8感染情况又鲜见报道。为此，笔者采用荧光定量 涤，入显色剂37℃避光显色 15min，终止反应 ，以空 白 PCR和ELISA方法，对洛 阳地 区480例无偿献血者 空调零，450nm波长测量各孔 的吸光度，换算出样品 HHV一8的感染进行检测和分析 ，报告如下。 抗体浓度，以大于5ng／L为阳性。 1 资料与方法 1．5 统计学方法 采用 SPSS17．0统计软件，采用 ’C 检验和行x列表的相关分析。 1．1 标本和试剂 所有标本取 自2011年6—8月洛阳 地区无偿献血者，标本资料由洛阳市中心血站提供，每 2 结果 份标本包括抗凝血和血清各0．5mL，共计480份，其中 2．1 PCR和ELISA检测结果 480例标本中HHV一8 男女各24O份，献血者年龄 l9～48岁，平均 (28．7±9．8) DNA阳性32例 ，阳性率6．7％；而血清 中HHV一8抗 岁。HHV一8ELISA检测试剂盒购 自上海丰翔生物科技 体阳性31例 ，阳性率6．5％。HHV一8抗体阳性的3l 有限公司。PremixExTaq (PerfectRealTime)TaqMan 例标本均为 HHV一8DNA阳性 ，仅有 1例 HHV一8 试剂盒购 自Takara公司，酶标仪Bio—radimark，PCR扩 DNA阳性而抗体阴性。PCR和 ELISA检测 HHV一8 增仪ABI7500fast。HHV一8检测引物和TaqMan探针序 阳性率，差异无统计学意义(P0．01)。 列见表 1，由上海生工科技有限公司合成。