黄瓜活性氧清除系统的影响.docVIP

盐胁迫下外源NO供体对白皮黄瓜幼苗活性氧清除系统的影响 一 .测定内容 对幼苗叶片的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶( SOD)、过氧化物酶( POD)和过氧化氢酶(CAT)活性、超氧阴离子自由基（O2.-）产生速率 、脯氨酸含量（植物体内的脯氨酸能促进蛋白质的水和作用,使蛋白质胶体亲水面积增大, 可溶性蛋白质增多, 降低细胞渗透势, 维持和稳定大分子物质, 参与叶绿素的合成, 维持细胞膜的正常功[1][2]。同时, 脯氨酸的积累能有效地缓解因盐胁迫引起的自由基和过氧化物对幼苗的伤害[3] 维持膜的稳定性, 增强黄瓜对逆境的适应性, 故植物在逆境胁迫时体内的脯氨酸积累, 对植物有一定的保护作用[4]） 二 材料 仪器 药品 材料：白皮黄瓜种子 药品：硝普钠(Sodium nitroprusside,SNP，NO供体)。先用ddH2O配制成100mmol/L的母液, 4℃下保存, 用时按照需要进行稀释。 茚三酮 冰醋酸 磷酸 .磺基水杨酸 冰醋酸 甲苯 盐酸羟胺 对氨基苯磺酸 冰醋酸水溶液 α-萘胺 聚乙烯吡咯烷酮 过氧化氢 甲硫氨酸 氮蓝四唑 EDTA-Na2 核黄素 愈创木酚 三氯乙酸（TCA ） 三氯乙酸 硫代巴比妥酸 脯氨酸 ddH2O（重蒸水） 蒸馏水 四水硝酸钙 硝酸钾 硝酸铵 磷酸二氢钾 硫酸镁 七水硫酸亚铁 乙二胺四乙酸二钠（EDTA.Na） 蒸馏水 碘化钾 硼 酸 硫酸锰 硫酸锌 钼酸 硫酸铜 氯化钴 0.1%的氯化汞溶液Na2S2O4），分析纯，粉末 1%TTC溶液 磷酸缓冲液（1/15mol·L-1，pH7） 1mol·L-1硫酸 0.4mol·L-1琥珀酸 仪器： 电子天平，培养箱 研钵 恒温水浴锅 。紫外分光光度计， 722型分光光度计 ；100ml小烧杯； 容量瓶（100.250.1000ml）；带塞的三角瓶 量筒 吸管 试管或指形 管数支 大试管；10ml试管3支 普通试管； 移液管 （0.5ml，1ml， 2ml，5ml 各2个） ；可调加样器 微量进样器 注射器； 高速台式离心机；冷冻离心机 . 荧光灯（反应试管处照度为4000Lx）； 珍珠岩6dm3 （14.4kg） 三 ：实验过程 .挑选籽粒饱满、整齐一致的种子催芽, 于装有洗净沙子（蛭石和珍珠岩）的营养钵 中, 子叶展平后, 用 Hoagland’s营养液代替自来水浇灌, 待幼苗长到2叶1心时，选取生长一致的健壮幼苗继续培养，对幼苗进行以下个处理[5] 每个处理重复3 次，每个重复 9 株 每盆株[]： 1正常营养液栽培( CK) ;其余三组100 mmol / L NaCl []胁 迫，并设置SNP浓度梯度： mmol / L SNP 3： 0.01 mmol / L SNP ： 0.1 mmol / L SNP ： 1.0 mmol / L SNP（由胥卯胜设置） 处理后第、、取幼苗叶片进行各项生理指标的测定[]，为保证处理浓度的稳定性, 处理期间每周更换1次营养液。;（为什么不多测几次，看对他们的影响趋势？一次能说明问题吗？）取生长点下的第二片展开叶，并测定其各项生理指标， （Hoagland’s营养液配方[9]：硝酸钙 945mg/L 硝酸钾 607mg/L 磷酸铵 115mg/L 硫酸镁 493mg/L 铁盐溶液 2.5ml/L 微量元素 5ml/LpH=6.0 改良霍格兰配方：四水硝酸钙 945mg/L 硝酸钾 506mg/L 硝酸铵 80mg/L 磷酸二氢钾 136mg/L 硫酸镁 493mg/L 铁盐溶液 2.5ml 微量元素液 5ml pH=6.0 铁盐溶液：七水硫酸亚铁 2.78g 乙二胺四乙酸二钠（EDTA.Na）3.73g 蒸馏水 500ml pH=5.5 微量元素液：碘化钾 0.83mg/l 硼 酸 6.2mg/L 硫酸锰 22.3mg/L 硫酸锌 微量元素液：碘化钾 0.83mg/l 硼 酸 6.2mg/L 硫酸锰 22.3mg