鸡血藤黄酮类化合物提取分离及抗氧化性的研究.doc

鸡血藤中黄酮类化合物提取、分离及抗氧化性的研究 张 夏 辉 指 导 老 师 蒋世云 教授 专 业 名 称 生物化工 学 科 门 类 工学 论文提交日期 2013年5月 分类号 密 级 UDC 学校代码 10594 题 目Studies on Extraction, Separation and Antioxidation Activity of Flavonoids in Spatholobus suberectus Dunn 姓 名 专业名称 学科门类 指导老师 论文提交日期论文答辩日期 答辩委员会主席 论文评阅人 独 创 性 声 明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下独立所取得的成果除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名： 日期 关于论文使用授权的说明 本人完全了解有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。 保密的论文在解密后应遵守此规定。 作者签名： 日期： 导师签名： 日期： 摘 要 鸡血藤具有活血补血的作用，能使血细胞增加，血红蛋白升高。其中起主要作用的是黄酮类化合物，此类化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、治疗心血管疾病、降低胆固醇等多种作用。鸡血藤资源分布丰富，含有大量的生物活性物质。本文以鸡血藤为原料，主要做了亚硝酸钠-硝酸铝比色法对鸡血藤中黄酮类化合物的测定条件的研究，提取分离工艺的研究，同时研究了鸡血藤中黄酮类化合物的抗氧化性。主要实验结果如下： 1 亚硝酸钠-硝酸铝比色法对鸡血藤中黄酮类化合物测定条件的选择。该方法中硝酸铝与黄酮类化合物所形成的络合物在510nm处有最大吸收峰，比色条件为5%的亚硝酸钠,10%的硝酸铝,1mol/L的氢氧化钠，显色时间为15min,使用50%的乙醇溶液定容。在该条件下测定总黄酮含量，其精密度、重复性和回收率的RSD分别为0.92%、0.48%和2.1%，可得结果稳定性较高。 2 鸡血藤中黄酮类化合物提取溶剂的选择。用水、95%乙醇、50%乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、石油醚8种溶剂，采用浸渍法，以物料比1:30，在50℃的温度下提取120min，通过比较黄酮化合物的提取率，得出使用50%乙醇作为提取溶剂最佳。 3 鸡血藤中黄酮类化合物提取工艺的优化。应用浸渍法提取鸡血藤具有省时，节省能源，高效等优点。由正交实验得出的最佳提取工艺为：提取浓度为50%的乙醇浓度，提取温度为80℃，提取时间为3h,料液比1：30，在该条件下鸡血藤中黄酮的提取得率最高，为7.75%。 4 鸡血藤黄酮类化合物的粗分离。采用两相溶剂萃取法对鸡血藤中的黄酮类化合物进行粗分离，实验结果表明:乙酸乙酯萃取物中黄酮化合物的含量最高，其次是乙醚萃取物，石油醚萃取物中的黄酮含量最小。通过两相溶剂萃取法分离得到的结果与单一溶剂提取结果相比，含量方面普遍偏低。 5 以清除率为指标，研究6种不同溶剂的提取液、VC对羟自由基和超氧阴离子自由基的抗氧化活性。结果表明：对羟自由基的清除作用50%乙醇提取液﹥氯仿提取液﹥乙醚提取液﹥乙酸乙酯提取液﹥丙酮提取液﹥石油醚提取液；对超氧阴离子自由基的清除作用50%乙醇提取液﹥丙酮提取液﹥乙醚提取液﹥乙酸乙酯提取液﹥氯仿提取液﹥石油醚提取液。对两种自由基的清除作用比较可知：石油醚提取液和氯仿提取液清除自由基的能力为羟自由基﹥超氧阴离子自由基；其他提取液对两种自由基的清除顺序一致，清