小红参组织培养的褐变因素及防止措施.pdfVIP

安徽农业科学，Journal ofAI1}lui hgri．Sci．2008，36(4)：1371—1372。1385 责任编辑 庆珞 责任校对 马君叶 小红参组织培养的褐变因素及防止措施 罗春梅 ，邱璐 ，杨清辉。，萧凤回。，刘爱民 ，张良彪 (1．云南省楚雄农校，云南楚雄675000；2，楚雄师范学院；云南楚雄675000；3．云南农业大学，云南昆明650201) 摘要 介绍不同消毒剂、消毒方法、外植体、基本培养基、活性炭浓度、暗培养时间、光照强度、培养方式对小红参组培褐变影响的研究。 关键词 小红参；组织培养；褐变因素；防止措施 中图分类号 $567．2 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(20o8)04—01371—02 BrowningFactors andPreventingMe~ wesintheTissueCulmre ofRubia ymmm~nsis LUO(1atm-mei et al (Chuxiong Agricultural School inYunnan Province，Chuxiong，Yunnan 675000) Abstract The res hes on the effects of different disinfectors，sterilizing methods，explants，basic media，active carbon conen．，culture time in daik- ness，illumination intensities and culture modes on the browning in the tissue culture of Rubia yurmanensis were introduced． Keywords Rubia yunnanensis；Tissue culture；S~owningfactors；Preventingllleasu／~$ 小红参为茜草科(Rubiaceae)植物云南茜草Rub／a yumu~． 体，消毒后接种于Ms+BA 5 ng／L+NAA 1．5 ng／L+活性炭1 nens／s(Franch．)Diels的全草，其性味甘、苦，微温，主要以根 L的培养基上，暗培养5 d后，分别置于1 000、2 000、3 000、 入药，有多种医疗效果l1 J。小红参极易褐化，组织培养往 4 000 k的光照强度下培养，并在培养25 d时观察外植体褐 往由于外植体的严重褐变而受阻，笔者针对影响小红参组培 变度情况。 褐变的几个因素进行对比试验，旨在探求简单有效的防褐 1．2．7 不同培养方式。用小红参的顶芽(或侧芽)为外植 措施。 体，消毒后接种于Ms+BA 5 ng／L+NAA 1．5 ng／L的固体培 1 材料与方法 养基(添加活性炭 1 g／L)和纸桥液体培养基上，暗培养5 d 1．1 试验材料 供试材料为经过1～2年人工种植的小红 后，置于1 500k的光照强度下培养对比，并在培养25 d时观 参(Rubia yurmanensis(Franch．)Diels)，取自楚雄农业学校的 察外植体褐变度情况。 药园，连根挖起带土移栽至实验室内预培养，每2～3 d用多 2 结果与分析 菌灵溶液喷布，15 d后取材进行试验。 2．1 不同消毒剂和消毒方法的消毒效果 由表1、2分析可 1．2 试验方法 知，用升汞对小红参进行消毒处理效果要显著优于次氯酸钠 1．2．1 消毒剂和消毒方法。选取健壮、无病虫的顶芽或侧 (P0．05)，其中75％酒清浸泡10 S后，再用0．2％升汞浸泡 芽，经清洗后，分别用 75％酒精、5％次氯酸钠；75％酒精、 8 min的方法是最佳的，污染率15％，成活率70％。随着酒精 0．2％升汞两组不同消毒剂和消毒方法处理。接种于MS+