H9和 H6亚型禽流感病毒二重 RT-PCR检测方法的建立.pdfVIP

中国畜牧兽医 , ( ): 2016 43 12 3101-3106 ChinaAnimalHusbandr Veterinar Mediciney y : / do 0.643 k.67-7236.20 6.2.003 和 亚型禽流感病毒二重 H9 H6 RT-PCR 检测方法的建立 1 ∗ 1 , , , , , , , , , 李 丹 谢芝勋 宋德贵 李 孟 谢志勤 罗思思 谢丽基 黄 莉 范 晴 黄娇玲 ( , ; , .广西师范大学生命科学学院 桂林 54 000 2.广西壮族自治区兽医研究所 , ) 广西兽医生物技术重点实验室 南宁 53000 : ( , ) 摘 要 试验旨在建立可同时鉴别检测 和 亚型禽流感病毒 avan nfuenzavrus AIV 的二重 方 H9 H6 RT-PCR 。 , , 法 根据 中 和 亚型 的 基因保守序列 分别设计 对特异性引物 优化引物浓度与退火 GenBank H9 H6 AIV HA 2 , 。 温度等条件 建立了可同时鉴别检测 和 亚型 的二重 检测方法 用该法对 和 亚型 H9 H6 AIV RT-PCR H9 H6 、 , AIV混合感染样品 H9 亚型 AIV单一感染样品和 H6 亚型 AIV单一感染样品进行扩增 结果均得到对应的目的 , 。 条带 而对其余亚型 及其他禽病病原体均未扩增出特异性条带 该法对 和 亚型 的检测下限均为 AIV H9 H6 AIV 4 / 。 、 、 , 5× 0 拷贝 μL 本研究建立的二重 RT-PCR检测方法特异性强 敏感性高 稳定性和重复性良好 可同时鉴别检 , 。 测 与 两种亚型 为 与 亚型 的监测