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人类微卫星多重PCR扩增体系的建立.pdf

湖北农业科学 第 50 卷第 18 期 Vol. 50 No.18 2011 年 9 月 Hubei Agricultural Sciences Sep. , 20l 1 人类微卫星多重PCR 扩增体系的建立 范晶 (乐山师范学院化学与生命科学学院,四川乐山 614侃)4) 摘要:采用模化何法从血液中提取基因组 DNA,根据GenBank 数据库中基因序列设计引物,分析不同寻l 物组合内部可能出现的~I 物潜在配对作用,针对多重 PCR 反应体系中的引物、反应缓冲液和缓离子浓度 设计实验纽合。结果表明,25 J..LL 反应体系中包含 l .4xPCR buffer , 2.5 mmoνL MgC1 , 0.6μmoVL 的各引 2 物对浓度时,3 对引物都能扩增得到条带清晰,亮度均一的目标产物。 关键询:多重 PCR; 人类很卫星;建立 中图分类号:Q987.2;Q75 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2011)18-3869-02 Establishment of Multiplex PCR System of Human Microsatellite Markers FAN Jing (College of Chemistry and Life Science , Leshan Nonnal Univers坷,Leshan 614α】4 , Sichuan ,China) Abstract: Genomic DNA was extracted from human blood using KI , primers were designed according to gene sequences in GenBank , then the potential interaction between different primers were analyzed. Combinations of different concentrations of primers , reaction buffer 朋dM旷 were added to optimize the PCR system. Results showed when l .4xPCR buffer , 2.5 mmoVL MgC12 , 0.6 J..LmoνL of each primer pair were in the 25μL reaction system , clear band wi由 homogeneous luminance was am- plified wi由皿yone of the 3 pairs of primers. Key words: multiplex PCR; human microsatellite markers; establishment 多重 PCR 在一个反应管内同时进行多个基因 公司),电泳仪(北京六一仪器厂), PTC-I00 常规 扩增,可以节省实验时间和实验成本,并可利用少 PCR 扩增仪(美国 MJ Research 公司)。 量样品去获得尽可能多的遗传信息[1.2] 。本研究分析 1

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