【优化方案】高中生物-第4章第2节 基因工程的操作程序课件 苏教版选修3.pptVIP

【特别提醒】　分子检测包括PCR检测和分子杂交检测。PCR检测只能检测目的基因是否导入受体细胞，形态检测可以判断目的基因是否表达。 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是(　　) ①检测受体细胞是否有目的基因 ②检测受体细胞是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出mRNA ④检测目的基因是否翻译出蛋白质 例3 A．①②③　　　B．②③④ C．①③④ D．①②④ 【思路点拨】　解答本题必须明确目的基因的鉴定和检测的含义，检测是分析目的基因是否导入受体细胞，鉴定是分析目的基因是否表达。 【解析】　目的基因的检测包括：检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是用DNA探针，使DNA探针与基因组DNA杂交。检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是用基因探针与mRNA杂交。最后检测目的基因是否翻译出蛋白质。方法是进行抗原—抗体杂交。 【尝试解答】　C 跟踪训练 2．下列哪项表述说明了目的基因表达成功(　　) A．用DNA探针检测目的基因出现杂交带 B．用DNA探针检测mRNA出现杂交带 C．用抗原—抗体杂交检测蛋白质出现杂交带 D．以上都不能说明 解析：选D。目的基因表达成功需从两个方面检测：一是分子水平检测，包括检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因，检测目的基因是否转录出mRNA，检测目的基因是否翻译成蛋白质。二是个体水平检测，如抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后，是否赋予了植物抗虫或抗病特性，需要做抗虫或抗病的接种实验。 知能优化训练 本部分内容讲解结束 点此进入课件目录 按ESC键退出全屏播放 谢谢使用 课堂互动探究 基因工程的基本操作程序 要点一 程序 方法 目的基因的获取 鸟枪法获取；利用PCR技术扩增；化学合成法合成 基因表达载体的构建 将目的基因与运载体结合，使目的基因稳定存在，遗传给下一代，并且能够表达和发挥作用 程序 方法 将目的基因导入受体细胞 导入植物细胞的主要方法是农杆菌转化法，还有花粉管通道法、基因枪法、氯化钙法、电击法、聚乙二醇法等 目的基因的检测与鉴定 形态检测分子检测 【特别提醒】　分子检测中的PCR检测和分子杂交检测只能说明目的基因是否整合到受体细胞中，而目的基因是否表达，可用提取目的基因的mRNA或分离目的基因编码的蛋白质来检测。 基因工程又叫DNA重组技术。 (1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的________为模板，________成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成________。 例1 (2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、________。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是________。 (3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有________种环状DNA分子,它们分别是___________________。 【思路点拨】　本题考查基因工程的相关知识，熟练掌握基因工程的四个步骤是解答本题的关键。 【解析】　在基因工程中，人工合成目的基因的途径有两条,其中之一就是以mRNA为模板经过反转录合成目的基因；基因工程常用的受体有细菌、真菌、动植物细胞；原核生物的基因中无内含子，若将真核生物的基因转入原核生物，需除去内含子部分；在 本题操作过程中，若在含有同一种限制酶切割的运载体和目的基因混合物中，加入DNA连接酶将会形成3种环状DNA分子，运载体自连而成的环状DNA分子，目的基因自连而成的环状DNA分子，运载体与目的基因片段相连的环状DAN分子。 【答案】　(1)信使RNA(mRNA)　逆转录(反转录)　双链DNA(目的基因)　(2)动植物细胞 　除去内含子　(3)3　运载体自连的、目的基因自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子 跟踪训练 1．我国科技工作者利用基因工程方法成功培育出抗虫棉，下列导入目的基因的做法，正确的是(　　) ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中　②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中　③将编码毒素蛋白的 DNA序列，与细菌质粒重组导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养　④花粉管未愈合前，剪去柱头，滴加编码毒素蛋白的DNA序列，使其借助花粉管通道进入受体细胞 A．①②　　　　　B．②③ C．③④ D．①④ 解析：选C。基因工程一般要经历四个步骤：首先获得目的基因，即获得编码毒素蛋白的DNA序列，再将其与运载体(质粒)结合，形成重组质粒。然后，把它导入受体细胞(棉