机械拉伸对骨髓间充质干细胞迁移行为的影响.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３２（５）：１６ 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 檪 檪 研究报告 殏檪檪檪檪檪檪檪檪檪殏 机械拉伸对骨髓间充质干细胞迁移行为的影响  李晓娜　宋关斌 　罗　庆 （重庆大学生物工程学院生物流变科学与技术教育部重点实验室　重庆　４０００４４） 摘要　目的：研究机械拉伸刺激对大鼠骨髓间充质干细胞迁移行为的影响并探讨其相关分子机 制。方法：应用单轴机械拉伸加载装置考察不同条件的周期拉伸刺激对大鼠骨髓间充质干细胞 迁移行为的影响，采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ和划痕法评价细胞迁移能力，采用明胶酶谱法检测基质金属蛋白 酶２，９（ＭＭＰ２，９）表达的变化。结果：适宜的拉伸刺激可以明显促进大鼠骨髓间充质干细胞 的迁移能力，１Ｈｚ、１０％应变拉伸８ｈ后可以使细胞迁移数量增加到对照组的１．５８倍。拉伸刺激 诱导骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶２，９（ＭＭＰ２，９）表达。抑制剂 ＧＭ６００１抑制了拉伸诱 导的ＭＭＰ２，９分泌增加，同时抑制了拉伸刺激对细胞迁移的促进作用。结论：机械拉伸刺激影 响大鼠骨髓间充质干细胞的迁移行为，ＭＭＰ２，９在此过程中可能起着重要介导作用。 关键词　骨髓间充质干细胞　机械拉伸　细胞迁移　基质金属蛋白酶 中图分类号　Ｑ２７ 　　骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍ 剪切应力和张应变等力学刺激对 ＢＭＳＣｓ增殖、分化行 ［３５］ ｃｅｌｌｓ，ＢＭＳＣｓ）具有高度自我更新能力和多向分化潜能， 为的影响 ，但ＢＭＳＣｓ在张应变作用下迁移行为变化 在特定环境条件下，ＢＭＳＣｓ可分化为成骨细胞、软骨细 特点及相关机理人们还了解不多。 ［１］ 　　另一方面，细胞向远端靶点迁移的一个关键因素 胞、脂肪细胞等多种细胞 。除具有易于分离获取、体 外增殖能力强、不涉及伦理、低免疫原性特点外，ＢＭＳＣｓ 是细胞具有跨过细胞外基质屏障的能力。为了穿过基 ［２］ 质屏障，细胞需要分泌特殊的蛋白水解酶，其中备受关 还具有趋化、迁移特性 ，在损伤组织的修复中起着重 要作用。从骨髓动员进入外周血向受损部位的定向迁 注的是基质金属蛋白酶（ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰｓ）。 研究证明， 移及其分子机理已成为 ＢＭＳＣｓ临床应用研究的关键 ＭＭＰｓ与细胞迁移的关系非常密切，在肿瘤 ［６］ ［７］ 问题。 细胞的侵袭／转移中起关键作用 。Ｓｗｅｅｎｅｙ等 的研 　　组织损伤发生后，ＢＭＳＣｓ感知损伤信号移出骨髓 究发现拉伸刺激诱导内皮细胞ＭＭＰ２表达并促进内皮 细胞的迁移，表明拉伸作用可能通过影响ＭＭＰ２的表 进入外周血循环，与靶组织血管内皮细胞粘附并穿过 达调节内皮细胞的迁移能力。本文主要研究机械拉伸 胞外基质屏障，然后到达损伤组织进行修复。可见， 刺激对ＢＭＳＣｓ迁移行为的影响以及ＭＭＰｓ在此过程中 ＢＭＳＣｓ进入外周血向远端靶点（损伤组织）的迁移行为 的作用。 是组织修复的一个关键环节，在此过程中血流动力（血 流产生的剪切应力和血管周向张应变）对 ＢＭＳＣｓ的生