ERK12对高糖环境下足细胞凋亡的作用和来氟米特对其的影响.pdfVIP

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2017-09-03 发布于贵州
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ERK12对高糖环境下足细胞凋亡的作用和来氟米特对其的影响.pdf

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ERK12对高糖环境下足细胞凋亡的作用和来氟米特对其的影响

山西医科大学硕士学位论文摘要目的观察 ERK1/2 对高糖环境下足细胞凋亡的作用及来氟米特对其的影响，以进一步探讨来氟米特对 DN 治疗作用及其可能机制。方法培养的人足细胞分为正常糖组、高渗对照组、高糖组，高糖组按不同刺激时间又分为0.5h、1h、6h、12h、24h 五组，应用 Western 印迹分析法检测各组足细胞ERK1/2 信号途径中 ERK1/2 蛋白活化的变化。足细胞凋亡检测：将足细胞分为高糖对照组、高糖+ 抑制剂组、高糖+抑制剂+来氟米特（A771726 ）组、高糖+A771726 组，将以上各组足细胞培养24 小时后，分别进行ERK1/2 信号途径的检测同前及流式细胞仪检测足细胞的凋亡率。结果（1）高糖组 30 分钟可以活化 ERK1/2 蛋白，6h 开始达高峰，持续活化到 24 小时开始降至基础水平。正常糖及高渗对照组未能活化 ERK1/2 。（2 ）与高糖组相比，ERK1/2 蛋白抑制剂（PD98059 ）抑制了 ERK1/2 的磷酸化，使磷酸化的 ERK1/2 （ P-ERK1/2 ）蛋白表达明显减少（P=0.003 ），从而影响了下游多种核转录因子的活化,影响目的基因的表达而增加了足细胞的凋亡（P=0.001 ）。（3 ）A771726 可以增加 P-ERK1/2 的表达量（P=0.002 ），从而减少足细胞的凋亡（P=0.021 ）。而PD98059 可以影响 A771726 的作用，使其对足细胞的保护作用减弱，其凋亡率比高糖组明显增加（P=0.006 ）。结 ERK1/2 信号途径参与了来氟米特对足细胞的保护作用。关键词糖尿病肾病；ERK1/2 ；来氟米特；A771726 ；足细胞 I 山西医科大学硕士学位论文 ABSTRACT Objective To investigate the effects of ERK1/2 and leflunomide intervention in podocyte induced by high glucose and relevant mechanisms. Methods hum