Exendin-4对不同热缺血时间心死亡供体大鼠胰岛功能影响的实验探究.pdfVIP

IIIII I FI I f III J I J ilJ 山llll IIIIIIIIIIIIIIIIIIllllIllI Y1 目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………4 二、英文缩略语………………………………………………………………………7 三、论文 000D·……………………………………………8……………………………………………子 前言………·…………………··0 刖吾………”…………………‘ 材料与方法………………………………………………………………………9 结果……………··………………………………………………···…………·12 讨论………………………………………………………·………………·…·22 结论……………………···………………………………………………··…·24 四、本研究创新性自我评价…………………………………………………………25 五、参考文献…………………………………………………………………………26 六、附录 综述………………………………………………………………··…………·28 致谢……………………………………………………………………………37 个人简介………………………………………………………………………38 ·中文论著摘要· Exendin．4对不同热缺血时间心死亡供体大鼠胰岛功 能影响的实验研究 目 的 胰岛移植是治疗糖尿病的理想手段，而胰岛细胞分离、纯化的数量及质量成 为胰岛移植成功的关键所在。影响因素包括移植早期供胰岛缺血缺氧损伤、氧化 应激，胰岛入血后即刻发生的血液介导的炎性反应以及免疫攻击等。其中，缺血 时间一直被认为是最重要的因素之一。众多研究普遍认为，热缺血时间超过30分 钟，对大鼠胰岛分离纯化可产生明显影响，不宜用于胰岛移植。本实验研究在体 导胰岛B细胞的凋亡，促进胰岛6细胞增殖，改善胰岛功能，针对胰岛移植早期 缺血的边缘供体如何处理提供有效方法。 材料与方法 一、材料 实验动物、主要设备、药品和试剂 普通级封闭群Wistar大鼠，雌雄，体重250-2809。鼠显微手术器械，超净手术 台，0．22urn除菌滤器，电热恒温水浴箱(DHW．600)，多功能振荡器，电子天平， C02细胞培养 微量加样器，荧光倒置显微镜(Olympus)，高速离心机(TDL．5A)， RPMI．1 640培养液，Exendin-4。 二、方法 (一)大鼠热缺血模型的建立。 大鼠秤重后，腹腔注射麻醉。腹部J下中切口进腹。剪开膈肌，用血管钳夹闭 心脏基底部致使心脏停搏，阻断胸一E动脉，造成心死亡供体(DCD)的热缺血模型。 (二)大鼠胰岛的分离和纯化。 采用明尼苏达大学改良法分离、纯化大鼠胰岛。胶原酶V原位灌注胰腺，快 速切取，水浴消化。再经80目不锈钢筛网过滤、离心。然后采用Ficoll不连续密 度梯度离心纯化胰岛。 (三)胰岛培养及分组 ． 根据实验条件随机分为三组(n=6)：第一组热缺血0分钟组：对照组(热缺血0 分钟胰岛细胞培养24 第二组热缺血30分钟组：对照组(热缺血30分钟