GM6001在LASEK术后角膜损伤修复中作用的探究.pdfVIP

GM6001在LASEK术后角膜损伤修复中作用的研究 摘 要 本实验旨在研究基质金属蛋白酶抑制剂GM6001在准分子激光角膜上皮下磨镶术(LASEK)术后 目的： 角膜损伤修复中的作用，探讨LASEK术后角膜愈合的机制。 方法：（1）GM6001 （基质金属蛋白酶抑制剂）眼液的制备（2 ）建立兔LASEK模型（3 ）27只新西 兰白兔(54只眼)术后随机分3组，每组6只兔，分别为基质金属蛋白酶抑制剂(GM6001)组、氟美童 （Fluoromethalone,FML ）组和阴性对照（negative control,NC ）组。分别于术后0.5月 、1月、2月共3 个时间点在裂隙灯下对兔角膜进行Haze评估并记录分级，各组随机选取3只兔行角膜共聚焦显微镜检 查，随后处死取角膜组织固定后分别行光镜、透射电镜观察，Ⅲ型胶原免疫组织化学法检测。 结果： 1、裂隙灯显微镜观察：术后0.5月和1月，Haze分级水平组间比较差异均有统计学意义（P0.01 ）， GM6001组和FML组Haze分级水平明显低于NC组（P0.01 ），但GM6001组和FML组相比，差异无统 计学意义（P0.05 ）；术后2月组间整体比较差异无统计学意义（P0.05 ）。 2 、角膜组织病理切片：兔LASEK术后不同时间点各组光镜下均见角膜上皮层明显增厚， 上皮细胞 呈6～7层，与NC组相比，GM6001组和FML组术区角膜前部基质内出现少量角膜基质细胞聚集。 3、角膜Ⅲ型胶原免疫组织化学法：正常兔角膜基质Ⅲ型胶原为阴性表达；NC组角膜Ⅲ型胶原呈强 阳性表达；GM6001组角膜Ⅲ型胶原呈弱阳性表达；FML组角膜Ⅲ型胶原呈阳性表达。 4 、角膜超微结构观察： 与NC组和FML组相比，GM6001组前基质成纤维细胞较较少，角膜基质层 胶原纤维粗细均匀且排列整齐规则，成纤维细胞体积小，细胞器含量少，细胞较稳定。 5、角膜共聚焦显微镜观察：兔LASEK术后各时间点GM6001组与其他两组比较前基质内的细胞排列 较规则。前基质细胞数量统计学分析， GM6001组术区前部基质内角膜细胞数与NC组和FML组相比， 差异有统计学意义(P 0.01)，后两组间差异有统计学意义( P 0.01) 。 GM6001通过抑制角膜基质细胞的增生及Ⅲ胶原纤维的合成，减少haze 的形成，其疗效与FML 结论： 相似。兔LASEK术后Haze形成的机制与手术损伤后引起角膜内MMPs 的释放增加，诱发角膜基质内 角膜细胞活化增殖，新生胶原纤维排列紊乱有关。 关键词：基质金属蛋白酶抑制剂；角膜；准分子激光角膜上皮下磨镶术；角膜上皮下雾状浑浊； I GM6001在LASEK术后角膜损伤修复中作用的研究 Abstract Objective： To investigate the effect of GM6001 on corneal damagement and restoration after laser epithelial keratomileusis, meanwhile, to explore the mechanism of corneal healing after laser epithelial keratomileusis. Methods ：(1)To make up the GM6001 eye drops (2)To build the LASEK models of rabbits (3)Twenty-seven New Zealand white rabbits were divided randomly into GM6001 group 、FML group and NC group, Corneal haze grade were evaluated by slim light at 0.5 、1and 2 mouth postoperative intervals. Two rabbits were randomly harve