Megsin对高糖环境中肾小球系膜细胞p38MAPK通路、ICAM-1和MCP-1的影响和其作用机制研究.pdfVIP

17 Y18001 目 录 中文摘要…………………………………………………………………l 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文 ICAM．1及MCP．1的影响及其作用机制研究 前言…·······…··········一··········……………………一””一一”一”8刖吞”一””一…““一”“一““一“”……………………一””一一”。”’萏 材料与方法……………………………………………………………9 结果……“一““一“”………………………………一””一……“一·22 附图…………………………………………………………………24 附表……………………………………………………………一·35 讨论”·…”一”“一…．．“一““一””一“…………………“一””一”一·40 结{仑…………”一””一””一……““一””…一“一一”“一…………一43 参考文献……………………………………………………………43 综述P38MAPK信号转导通路与糖尿病肾病……………………………47 致谢·………······……………………·········…···········………···54 个人简历……………………………………………………………………55 中文摘要 及MCP．1的影响及作用机制研究 摘 要 目的：当前糖尿病肾病(Diabetic 肾病维持性透析的主要病因，给家庭和社会带来了沉重的经济负担和精神 压力。糖尿病肾病主要病理特征是肾小球系膜细胞肥大、细胞外基质 发现的一种在肾小球系膜细胞优势表达基因，其表达产物属于丝氨酸蛋白 酶抑制剂(serine protease with s a to )。 的作用包括凝血、 cell．predominantgene homology 纤维蛋白溶解、细胞外基质代谢、炎症反_e应rpi、n细胞Se分rp化in、增殖和凋亡等。 已有研究发现，其在以系膜细胞增生、系膜基质积聚为主要病理改变的糖 尿病肾病中，其基因与蛋白表达水平显著上调。megsin基因与蛋白的表 达上调在糖尿病肾病发病机制中的作用目前已受到国内外学者的关注。高 球系膜细胞，抑制细胞外基质的降解，促进细胞外基质如Ⅳ型胶原、FN 的合成，从而参与肾小球硬化的过程。但在高糖刺激转染Megsin基因的 系膜细胞是否会通过p38MAPK通路进而影响氧化应激及炎症因子的产 生，促进DN的发展，目前国内外尚无研究。 siRNA基 (GSH．PX)、丙二醛(MDA)等表达的变化，以及通过转染Megsin 因，观察megsin低表达时高糖环境中肾脏系膜细胞上述各因子的表达情 况，从而探讨megsin在糖尿病状态下系膜细胞中的作用机制，进一步寻 找糖尿病肾病早期干预的新靶点，为人类早期防治糖尿病肾病提供实验性 的理论依据。 方法：建立稳定表达megsin的小鼠系膜细胞株(M组)，应用脂质体 中文摘要 siRNA质粒系膜细胞(S组)，同时设立野生型小鼠 2000瞬时转染megsin 系膜细胞正常糖培养组(N组)、高糖培养组(D组)和空质粒对照+高糖 集各组细胞及上清，提取蛋白，应用westernblot测定各组总蛋白中 GSH．PX、MDA含量的变化。免疫细胞化学染色，检测上述指标的表达， 况并进行定位、定性及半定量分析，结果用均数士标准差(x士s)表示，组 间差异性比较采用单因素方差分析和q检验，显著性水平等于0．05，应用 SPSS15．0软件包对所有