Micro RNA在外阴鳞状细胞癌中的表达情况和临床意义.pdfVIP

·中文论著摘要· Micro RNA在外阴鳞状细胞癌中的表达 情况及临床意义 目的 利用MicroRNA基因芯片技术，探讨MicroRNA在外阴鳞状细胞癌组织中的 表达情况及其临床意义 材料与方法 一、材料 选择中国医科大学附属盛京医院妇产科2010年3月至12月诊断为外阴鳞状 细胞癌并行手术治疗的3例患者的外阴癌新鲜组织做为病例组，病例组患者癌旁 阴性切缘组织作为对照组． 二、主要试剂 mini 主要试剂及仪器： kit； 19a Power标记试剂盒；芯片 nodrop分光光度计；凝胶电泳；miRCURY偶Array miRCURYTMLNA 4000B芯片扫描仪 Array(v．16．0)(Exiqon)；GenePix 三、方法 minikit(QIAGEN) RNA抽提使用RNA抽提齐UTRIzol(Invitrogen)年HmiRNeasy 进行样品RNA抽提，有效地恢复所有RNA物种，包括miRNAs．使用nanodrop分光光 度计进行RNA的质量检测，用凝胶电泳检测RNA的纯度及完整性。 RNA标记RNA分离以后，采用miRCURYl”ArrayPower标记试剂盒，用标记酶将 Hy3例或Hy5埘荧光基团标记miRNA。 miRNA)杂交，使用GenePix4000B芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度。 四、统计学分析 使用GenePix4000B芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度，并将实验结果转换成 Pro6．0software(Axon)进行栅极调 数字型数据，扫描的图像输入到GenePix 整和数据分析。选择均一化后miRNA和强度=50的miRNA，计算归～化因子。用 Plot、 Plot、Volcano 中位数法标准化，标准化后，差异表达的miRNA通过Scatter MEV(v4．6，TIGR)等软件对数据进行分析，得出结论 结果 (PO．05)，其中20个miRNA表达上调，22个miRNA表达下调。 结论 外阴鳞状细胞癌组织中miRNA表达存在明显差异，其中miRNA(miR一99b、 miR一21 的参考指标。 关键词 RNA； 外阴鳞状细胞癌：Micro 2 ·英文论著摘要· VUIvar an ofNIlcroMicroK州AIn noissExterpxandanifiras12mlicancevluv‘‘NR ●- ● Carclnoma cell