Mdx小鼠骨骼肌纤维化和Spp1基因表达.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………1 英文摘要．…．．………………………………………．．．4 英文缩写．．．．．．……．．…．………………………………8 研究论文Mdx小鼠骨骼肌纤维化及Sppl基因表达 前言……………．…………………………．……．9日U舌……………．…………………………．……．了 材料与方法………………………………………．．10 结果．．…．．．……．．．………………………………17 附图…．．．．．．………．……………………………．19 附表……………………………………………．．23 讨论……………………………………………．．24 结论…………………………．．……．．…………．27 参考文献…………………………………………．27 综述DMD中纤维化研究进展……………………………．．33 致谢…．……………………………………………．．45 个人简历．……．…………………．…………………．．46 万方数据 中文摘要 Mdx小鼠骨骼肌纤维化及Sppl基因表达 摘 要 muscular 目的：Duchenne型肌营养不良(Duchenne 是以进行性、对称性近端肌肉无力及肌肉萎缩为主要临床特征，以肌肉纤 维变性、坏死及纤维化为主要病理特征的X连锁隐性遗传性疾病。患者 通常3．5岁隐袭起病，常于12岁出现不能行走，于20．30岁死于呼吸道 感染和心力衰竭。 肌肉变性、纤维化的具体机制尚不清楚。纤维化是一种细胞外基质 fextracetlular matrix，ECM)逐渐沉积、实质细胞逐渐减少的病理改变，可 发生于多种不同的器官组织，纤维化的持续进展可致器官结构破坏、功能 生改变，完整性遭到破坏，当受到机械性刺激时，大量钠离子和钙离子内 流。细胞内钠离子浓度升高，造成细胞水肿；而钙离子进入细胞内后，作 为第二信使激活炎症进程的级联放大反应。同时，炎症细胞释放促纤维化 失衡，出现纤维化。 分泌型焦磷酸蛋白1(Secreted 1)是一种具有 phosphoprotein1，Spp OPN作为一种重要的多功能糖蛋白，存在于细胞外基质中，由多种组织 及细胞合成和分泌，可与纤连蛋白和胶原等基质分子结合影响细胞外基质 重塑，在梗阻性肾病、心肌梗死、创伤修复等纤维化过程中均发挥了重要 作用，但目前关于DMD中Sppl与肌纤维化关系的研究较少。 Mdx小鼠因与人类具有相同的基因遗传学基础，被广泛应用于DMD 的相关研究中。我们的实验主要关注于mdx小鼠骨骼肌中纤维化情况， 研究纤维化相关基因在mdx小鼠不同时期的差异表达情况，以及Sppl基 因在mdx小鼠及对照鼠中不同时期的表达量变化，进～步探讨在mdx小 鼠中Sppl与肌纤维化的关系。 万方数据 中文摘要 12周组。每组选取6只，分别用于常规组织化学染色、基因芯片检测 四头肌，分别进行包埋冰冻处理或直接冰冻处理。通过冰冻切片的常规染 色(既染色)及马松(masson)染色观察骨骼肌纤维化情况；使用基因 芯片技术对mdx小鼠不同时期股四头肌进行基因表达谱分析，使用 况，并应用spssl3．0对数据进行分析。 结果： 1不同时期mdx小鼠肌肉纤维化情况 HE染色及马松染色显示mdx小鼠股四头肌纤维化情况：2周时肌 纤维排列紧密，个别肌纤维出现变性，未见明显的肌再生，无结缔组织增 生；4周时，出现肌肉变性坏死与再生，但肌纤维排列仍较紧密，无明显 结缔组织增生；8周时，可见轻微的肌纤维排列疏松，部分小片状区域可 见轻度结缔组织增生；12周时，结缔组织增生程度较8周稍加重，但仍 为小片状区域的纤维