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2 Med19 促进乳腺癌生长增殖的机制研究 中文摘要 Med19 促进乳腺癌生长增殖的机制研究 中文摘要 目的 探讨Med19 通过CBFA2T3-HEB 通路促进乳腺癌生长增殖的机制。 方法 构建 siRNA-Med19 慢病毒表达载体、Med19 过表达慢病毒载体（LV- Med19 ）和CBFA2T3 过表达慢病毒载体（LV-CBFA2T3 ）。应用Med19 RNAi 慢病 毒（siRNA-Med19 ）表达载体感染 Med19 高表达的 MDA-MB-231 、MCF-7 细胞， 分别分为感染 siRNA-Med19 慢病毒表达载体组（KD 组）、空载体对照组（NC 组）及空白对照组（CON 组）三个处理组；应用 Med19 过表达慢病毒载体和 CBFA2T3 过表达慢病毒载体感染 Med19 低表达的 BT549 、Hs578T 细胞，分别分为 a: CON-Med19; b: LV-Med19; c: LV-Med19+CON-CBFA2T3; d: LV-Med19+LV- CBFA2T3 四个不同处理组。MTT 实验和克隆形成实验检测细胞的生长增殖能力， RT-PCR 和Western blot 检测各组细胞Med19 、CBFA2T3 及HEB 的转录及蛋白表达 水平。提取25 例人乳腺癌组织蛋白，Western blot 检测Med19 、CBFA2T3 蛋白表达 水平，SPSS18.0 统计两者相关性。 结果 Med19 RNAi 慢病毒感染 Med19 高表达的人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 和 MCF-7 （KD 组），与 NC 组、CON 组相比，细胞增殖速度和克隆形成能力显著降 低，差异具有统计学意义（P0.05 ）。RT-PCR 和 Western blot 检测结果显示，KD 组Med19 mRNA 及蛋白表达与NC 组、CON 组相比显著下降，CBFA2T3 mRNA 及 蛋白表达显著升高，HEB mRNA 及蛋白表达量显著降低，差异均具有统计学意义 （P0.05 ）。提示下调 Med19 表达可抑制乳腺癌细胞的生长增殖，其作用可能是通 过上调CBFA2T3 并抑制HEB 表达发挥作用。Med19 过表达慢病毒载体感染 Med19 低表达的 BT549 、Hs578T 细胞 （LV-Med19 组），与空载体对照组 （CON-Med19 组）相比，细胞增殖速度和克隆形成能力显著增加 （P0.05 ）；LV-Med19 组 Med19 的表达量较CON-Med19 组显著升高，CBFA2T3 表达量显著下降，HEB 表达 量显著增高，差异均具有统计学意义（P0.05 ）。提示上调 Med19 可促进乳腺癌生 长增殖，其机制可能是通过抑制 CBFA2T3 表达和促进 HEB 表达发挥的。同时上调 I 中文摘要 Med19 促进乳腺癌生长增殖的机制研究 Med19 和 CBFA2T3 表达的LV-Med19+LV-CBFA2T3 组，与仅上调 Med19 表达的 LV-Med19 +CON-Med19 组相比，细胞增殖和克隆形成受到显著抑制，其水平趋近 空载体对照组（CON- Med19 组），表明上调 CBFA2T3 表达可消除 Med19 高表达 对细胞生长增殖的促进作用。在人乳腺癌组织中，Western blot 检测结果显示Med19 和CBFA2T3 蛋白表达呈负相关 （r=-0.553, P0.01 ），进一步证实 CBFA2T3 表达受 Med19 的调控。 结论 1. Med19 基因高表达，促进乳腺癌细胞生长增殖； 2. Med19 基因通过抑制 CBFA2T3 基因表达，进而促进 HEB 的表达而发