共刺激分子B7-H3在支气管哮喘中的作用探究.pdfVIP

共刺激分子B7-H3 在支气管哮喘中的作用研究 中文摘要 共刺激分子B7-H3 在支气管哮喘中的作用研究 中文摘要 第一部分 可溶性B7-H3 在支气管哮喘患儿血浆中的 表达及临床意义 目的：研究支气管哮喘患儿外周血中可溶性B7-H3 （sB7-H3 ）的表达水平，并分 析其与细胞因子水平的相关性，探讨sB7-H3 的异常表达在支气管哮喘急性发作中的 临床意义。 方法：选取2012 年 1 月～2012 年 12 月在苏州大学附属儿童医院呼吸科住院的 支气管哮喘患儿21 例，并选取外科择期手术 （腹股沟斜疝、血管瘤、腺样体肥大） 而住院的患儿 16 例作为对照组儿童，分为支气管哮喘急性发作期组 （A 组）、恢复 期组 （B 组）及对照组 （C 组）。同时采集支气管哮喘患儿急性发作期及恢复期的外 周血，以及外科择期手术患儿的外周血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA ）检测血浆 中sB7-H3 、IFN-γ 、IL-4 及IL-10 的表达水平，及分析支气管哮喘患儿急性发作期血 浆中sB7-H3 的水平与细胞因子IFN-γ 、IL-4 、IL-10 的相关性。 结果：哮喘急性发作期组血浆中 sB7-H3 的水平明显高于恢复期组及对照组 （P0.05 ），而恢复期组虽高于对照组，但无统计学差异；哮喘急性发作期组血浆中 IFN-γ 、IL-10 水平均低于恢复期组及对照组 （P0.05 ），恢复期与对照组相比无统计 学差异；血浆中IL-4 的水平在哮喘急性发作期组与恢复期组均高于对照组（P0.05 ）， 且哮喘急性发作期组的表达水平高于恢复期组（P0.05 ）。支气管哮喘患儿急性发作 期血浆中sB7-H3 的表达水平与IL-4 的水平具有正相关性，与IFN-γ 、IL-10 的水平无 相关性。 结论：sB7-H3 在支气管哮喘急性发作期异常高表达；sB7-H3 可能通过增强Th2 细胞因子的分泌而在支气管哮喘的急性发作期起作用。 关键词： sB7-H3 ；支气管哮喘；Th2 细胞；细胞因子 I 中文摘要 共刺激分子B7-H3 在支气管哮喘中的作用研究 第二部分 抗B7-H3 单克隆抗体对哮喘小鼠模型的作用研究 目的：探讨抗B7-H3 单克隆抗体对哮喘小鼠模型诱导期及效应期的治疗作用。 方法：6-8 周龄雌性BALB/c 小鼠（18-20g ），随机均分为5 组，每组10 只，分 别为哮喘组（A 组），生理盐水对照组（B 组），IgG 组（C 组），抗B7-H3 抗体诱 导期组（D 组），抗B7-H3 抗体效应期组 （E 组）。A、C、D 、E 组均给予OVA 致 敏及激发（0、10 天给予OVA 腹腔注射致敏，第20 天给予OVA 雾化吸入，每天半 小时连续7 天），C 组、D 组在第2 ，7，11，14，18 天分别给予腹腔注射IgG 、抗 B7-H3 抗体，E 组在第2 ，7，11，14，18 天给予腹腔注射IgG，第21 ，24 ，26 天腹 腔注射抗B7-H3 抗体（OVA 雾化1 小时前注射）。B 组给予同剂量生理盐水注射、 激发。各组小鼠于末次激发2 小时后麻醉处死，采集标本。小鼠进行肺泡灌洗，肺泡 灌洗液（BALF ）进行细胞总数计数及分类计数；并采用ELISA 测定小鼠BALF 中的 IFN-γ 、IL-4 、IL-17 的水平；小鼠肺组织切片行HE 染色、PAS 染色及免疫组化法（SABC 法），观察肺组织炎性细胞及嗜酸性细胞浸润情况、气道粘液分泌情况及 B7-H3 表 达情况。 结果：哮喘组肺泡灌洗液（BALF ）中的细胞总数及嗜酸性细胞数多于生理盐水 对照组及抗B7-H3 抗体诱导期组，差异具有统计学意义（P0.05 ），哮喘组、IgG 组、 抗B7-H3 抗体效应期组BALF 中细胞总数及嗜酸性细胞数比较差异无统计学意义， 抗B7-H3 抗体诱导期组BALF 中的细胞总数及嗜酸性细胞数高于生理盐水对照组， 差异具有统计学意义（P0.05 ）。哮喘组、IgG 组、抗B7-H3 抗体诱导期组及抗B7-H3 抗