高糖、高脂肪饮食诱导胰岛素抵抗大鼠内皮依赖性血管舒张功能的探究.pdfVIP

中文 摘 要 高旅、高脂肪饮食诱导胰岛素抵抗大鼠内皮依赖性血 管舒张功能的研究 摘 要 目的:血管内皮的损伤及功能障碍是动脉粥样硬化的始 动因素，其发生发展与胰岛素抵抗 (IR)密切相关。以一氧 化氮 (NO)为代表 的 内皮源性血管舒张 因子 (endothelium-derivedrelaxingfactor,EDRF)的分泌和调节 功能失调，是内皮功能异常和内皮细胞损伤的重要特征。本 研究旨在用高糖、高饱和及高不饱和脂肪酸饮食喂养正常成 年大鼠，观察不同饮食对大鼠胰岛素抵抗和血管内皮依赖性 舒张的影响及NO在血管内皮损伤中的作用，探讨2型糖尿 病，胰岛素抵抗患者血管并发症形成的可能机制。 方法:清洁级健康成年雄性Wistar大鼠56只 (购于河 北医科大学实验动物中心)，体重250-300g，适应性喂养一 周后随机分为四组，每组16只，正常对照组(NormalControl, NC组)，实验组分为高蔗糖组 (Highsucrose,HS组)，高饱 和脂肪酸饮食组 (Highsaturatedfatytacid,HSF组)、高不饱 和脂肪酸饮食组(HighUnsaturatedfatytacid,HUF组)。正常 对照组给基础饲料，热量组成为碳水化合物占65.5%，脂肪 占10.3%，蛋白质占24.2%;高糖饲料是在基础饲料中添加 20%蔗糖使碳水化合物热卡占76.5%，脂肪热卡占7%，蛋白 质热卡占 16.5%;高饱和脂肪酸饲料是在基础饲料中添加 20%牛油使饲料中碳水化合物热卡占43%，脂肪热卡占41%, 蛋白质热卡占16%;高不饱和脂肪酸饲料是在基础饲料中添 中丈 摘 要 加20%豆油配制而成，其热卡比例同高饱和脂肪酸组.牛油 中饱和脂肪酸含量69.1%，不饱和脂肪酸含量30.9%;豆油 中不饱和脂肪酸含量84%，饱和脂肪酸含量 16%:蔗糖纯度 99%。所有饲料均由河北医科大学实验动物中心配制。喂养 24周。喂养前及喂养后每四周监测大鼠体重、血压，并心脏 采血测空腹血糖 (FBG)，血清甘油三醋 (TG)，血清总胆固 醇 (TC);0,12,24周心脏抽血离心后取上清，用硝酸还 原酶法及铜显色法分别测定血中一氧化氮 (NO)及游离脂 肪酸 (FFA)的含量。于实验最后一周在各组随机抽取6只 大鼠做高胰岛素一正葡萄糖钳加实验，取8只麻醉后处死取下 肾动脉，用Myograp妙微血管测定技术检测肾动脉对累积浓 度乙酞胆碱 (Ach)(或硝普钠SNP)张力变化，然后分别在 浴槽中加入以下药物:1护mol/1一氧化氮合酶 (NOS)底物 L一精氨酸 (L-Arg),NOS非选择性抑制剂N一硝基L一精氨酸 (L-NNA),10-SmoUl鸟昔酸环化酶抑制剂亚甲蓝 (Mb)预 孵育20分钟后，观察肾动脉对累积浓度乙酞胆碱 (Ach)张 力变化并记录。 结果:1.自12周后HUF组、HSF组大鼠体重明显增 加，和同期NC组比具显著性差异 (p0.05或p0.01),HS 组体重增加不明显，24周时NC组、HS组、HUF组、HSF 组体重较0周分别增加了25.3%,32.1%,37.4%,35..7%0 2.各实验组的血压随喂养时间的延长逐渐升高，HSF, HUF组与HS组的收缩压均从第四周开始与NC组血压差别 有显著性 (P0.05)，一直延续到24周 (P0.01)，实验三组 间差别没有显著性 (p0.05). 3.血生化指标:空腹胰岛素、空腹血糖、血清总胆固醇、 z 中文 摘 要 甘油三醋含量三组均高于对照组(仍o.os或P0.01)，实验组 间无显著差异 (P0.05)，实验组以HSF组血清总胆固醇、 甘油三醋含量升高最早，与对照组出现差别最早。HS组、 HSF组和HUF组喂养第8周空腹胰岛素及空腹血糖同时开 始与NC差别有显著性，一直延续到24周印0.05或p0.01), 但实验三组间统计学差别没有显著性 (p0.05). 4.不同饮食喂养 12周后，各实验组游离脂肪酸水平较 NC组显著升高 ((P均0.01),HSF组