高糖状态下肾小球系膜细胞JAK2STAT3途径的表达变化和作用的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 高糖状态下肾小球系膜细胞JAK2／STAT3 途径的表达变化及作用的研究 刖 吾 糖尿病是一组以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，长期高血糖状态可导致。肾 脏的组织损伤、功能障碍和衰竭。在许多国家，糖尿病肾病(DN)己成为导致慢 性。肾衰的主要病因，在我国DN导致肾衰比率也呈上升趋势。目前认为，DN发生 发展机制尚未完全明确，亦缺乏有效的防治方法。因此，进一步探明DN发病机 制并寻找延缓DN进展的方法是目前亟待解决的问题之一。 目前发现糖尿病微血管病发生过程中多条细胞内信号转导通路(DAG／PKC、 MMPK、JA刚STAT)被激活，即高糖可以通过激活多种细胞内信号因子从而导致 靶器官损伤。近年来有研究提示，Janus激酶／信号转导子与转录激活子(Janus transducersandactivatorsof kinasc／signal 的增殖、肥大及细胞外基质分泌有关。但高糖状态时，STAT家族哪些成员被激活 活对。肾脏起什么作用?这些问题有待进一步研究。 糖尿病。肾病的主要病理变化为肾小球肥大、细胞外基质聚集、基底膜增厚。 研究证实转化生长因子．pl(TGF．p1)是引起细胞外基质增多的中介物质，在糖尿 病肾病的发生发展中起着关键作用。结缔组织生长因子(CTGF)作为TGF．D1的 下游调节因子，介导和调节着TGF．131的促胶原合成与致硬化作用。而在TGF．pl 被阻断的情况下，CTGF也可以直接上调粘连蛋白、胶原在系膜细胞外的积聚，说 物)诱导NRK．49F(肾脏成纤维细胞)有丝分裂和胶原合成的研究和过氧化物对 表达增加尚未见研究报道。 II表达 RAS系统激活与DN发生发展密切相关。高糖环境可以使细胞内Ang II可以通过G 增加，而增加的AnglI又进一步加强高糖对系膜细胞的作用。Ang II共同存在情况下， 蛋白偶联的ATl受体引起JAK／STAT通路的活化。高糖和Ang 是否通过JAK／STAT通路的活化而影响DN的病理生理过程，还有待于进一步研 究。 为此我们设计了以下实验： 1、通过观察高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)P．STAT3的表达变化， 探讨糖尿病状态下JAK2／STAT3途径活性的变化。 下系膜细胞TGF．p 通路与TGF．p1、CTGF之间的相互作用及对细胞外基质分泌的影响。 II)刺激GMC，观察不同时点p-STAT3、 3、通过不同浓度血管紧张素II(Ang AngII共同作用对GMC分泌TGF—p1、CTGF、FN的影响。 一、高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞JAK2／STAT3通路活化 目的通过观察高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)p．STAT3的表达变化， 探讨糖尿病状态下JAK2／STAT3途径活性的变化。 方法GMC同步化后分为：正常糖浓度组(含糖5．5mmol／1)；高糖浓度组(含 mmol／1甘露醇)；正常糖+AG-490 糖25mmol／1)；甘露醇组(含5．5mmol／l葡萄糖+19．5 Western Blot及细胞免疫化学方法检测系膜细胞STAT3、p．STAT3的表达变化。 结果 升高，甘露醇组与正常糖浓度组相比差异无统计学意义；各组之间STAT3表达差 异无统计学意义。AG．490抑制高糖下P．S仉玎3的表达，而对STAT3表达无明显影 响。 2 小结 可以抑制GMCJAK2／STAT3信号转导通路的活化。 B1、CTGF、FN表达的影响 CTGF及对细胞外基质分泌的影响。 方法1、AG．490预处理GMC同步化后分为：正常糖浓度组(N，含糖 糖+19．5 CTGF、FN的mRNA表达，Western