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菌固态发酵产酶的研究进展 固态发酵工艺是很古老的技术，从远古时代人们就已利用固态发酵制造食品、干酪和堆肥。随着世界能源危机的出现和环保意识的增强，固态发酵工艺以其高产、简易、低投资、低能耗、高回收、无泡沫、需控参数少、无或少环境污染等突出优点再次引起人们的兴趣。固态发酵现已在众多的领域得到应用，如在治理环境方面，在生物饲料生产领域等。利用固态发酵进行各种酶类的生产已经成为常用的技术手段。生产的酶类如下：①纤维素酶：纤维素酶系一般包括三种水解酶，即内切葡聚糖酶(Cx ）、外切葡聚糖酶（C1 ）、β一葡萄糖苷酶（βG ）。C1酶可作用于不溶性纤维素表面，使结晶纤维素链开裂，长链纤维素分子末端部分游离，从而使纤维素链易于水化；Cx 酶是进一步作用于经C1酶活化的纤维素，可分解β一1 , 4 一键，生成纤维二糖，纤维三糖；那酶是作用于纤维二糖，纤维三糖，最终使之分解为葡萄糖，纤维素就是在这三种酶的共同作用下被水解的。因此，纤维素酶在食品、饲料、农副产品加工、石油开采和资源再利用等方面具有广泛的用途和应用前景；② 木质素酶：木质素酶作用是一种非专一性的以自由基为基础的链反应过程。木质素酶不仅对木质素，而且对许多种类的有机物尤其是人工合成的有机污染物都有很强的降解能力，而且具有高效、低耗、高适用性等特点；③ 半纤维素酶：半纤维素酶是分解半纤维素的一类酶的总称，主要作用是降解畜禽消化道内的非淀粉多糖，降低肠道内容物的豁性，促进营养物质的消化吸收，减少畜禽下痢，木聚糖酶是其中的一种。木聚糖酶是一种复合酶，包括β-1 , 4 一木聚糖酶和β－木糖苷酶。前者主要以主链内部作用于木糖苷键，将大分子木聚糖降解成寡聚木糖、木二糖及少量木糖，后者作用于木寡糖或木二糖末端，释放出木糖；④ 其他酶类：果胶酶是分解果胶质的多种酶的总称。广泛应用于果汁，果酒的澄清等；聚半乳糖醛酸酶是果胶酶的重要组分，它专一性的分解果胶质中两个非酷化半乳糖醛酸间的糖昔键。a 一转移葡萄糖昔酶可以从低聚糖类底物的非还原性末端切开a 一1 , 4 一糖苷键，释放出葡萄糖或将游离出的葡萄糖残基以a 一1 , 6 一糖苷键转移到另一个糖类底物上，从而得到低聚异麦芽糖、糖脂或糖肤等。 1 产纤维素酶的菌种及其发酵条件研究 1．1 木霉及其固态发酵条件研究 木霉菌属于半知菌亚门，丝抱纲，丝饱目，勃抱菌类，是一类普遍的真菌。采用固态发酵培养，液料比在整个发酵过程中是对产酶影响最大的因素，温度在发酵初期影响最大，初始pH 值和接种量的影响不显著。从众多研究中得出，培养温度、初始pH 值、液料比和接种量分别是30 ℃ 、4 、7 和5 ％是比较合适的。 1 . 1 . 1 绿色木霉（Trichoderma viride ）及其发酵条件 绿色木霉是木霉中具有重要经济意义的一种，在自然界分布广，所产生的纤维素酶具极高降解力。影响纤维素酶产量和酶活的因素很多，除菌种本身的个体差异外，培养基及其培养条件是影响发酵产酶的主要因素。戴四发等在研究绿色木霉产纤维素酶特性时发现，培养基中碳源及其一些物质对纤维素酶复合系中各组分的分泌呈现不同的规律：分别以纤维素粉或麦鼓为惟一碳源时，Cx 酶最早呈现最高酶活，而按比例混合作为碳源时则各酶组分较一致的呈现最高酶活形式。姜绪林等在通过麦角固醇测定绿色木霉固态发酵产的纤维素酶的生物量的同时，对培养基进行了初步优化，获得了最佳培养基组分：碳源为蔗糖，无机氮为硫酸钱时，水料比2 . 2 : 1 , pH 5 . 5 ，用该培养基得到的经甲基纤维素酶活（CMC 酶活）和滤纸酶活分别比优化前提高了21 . 0 ％和44 . 1 % ；陈书峰等以稻草和数皮的混合物为主料，研究发现稻草经4 % , 40 ℃ 的氢氧化钠溶液浸泡24h 后以30 ％质量比添加到鼓皮中发酵，滤纸酶活和CMC 酶活比未经处理组提高了27 . 5 ％和25 . 6 % ，最终优化发酵条件为：培养温度30 ℃ ，接种量20 % ，培养基初始含水量45 % - 60 % ，此时滤纸酶活和CMC 酶活可达5 ．15IU · g-1，（干物质）和38 . 46 IU · g-1，（干物质）。徐春厚对绿色木霉固态发酵产纤维素酶优化条件研究表明，培养基中稻草粉和熬皮比例1 . 5 : 1 ，料水比1 : l . 5 ，氮源为2 . 2 ％一2 . 5 ％的硫酸铵，起始pH 6 . 0 一6 . 5 , 250 mL 三角瓶中装培养基15 – 20g，培养60h ，室温下发酵可获得最高酶活。 1, 1 . 2 康氏木霉（Trichoderma koningii）及其发酵产酶条件研究石长波等对脱脂豆粕和氨化大豆秸秆固态发酵进行产酶研究得出，影响康氏木霉固态发酵的主要因素为温度、pH 值、培养基液料比及其培养