RP-HPLC法测定复方金蒲片中延胡索乙素含量.docVIP

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RP-HPLC法测定复方金蒲片中延胡索乙素含量

RP-HPLC法测定复方金蒲片中延胡索乙素含量   作者:黄明立,黄东萍 ,蒋贵发,刘宗河 【摘要】 目的 建立复方金蒲片中延胡索乙素的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil BDS-C18,流动相为甲醇-5%乙酸(40∶60),并用浓氨试液调至pH 4.7,流速1.0 mL/min,柱温为25 ℃,检测波长280 nm。结果 延胡索乙素浓度在0.436~2.180 ?g范围内峰面积与浓度呈良好线性关系,r=0.999 7, 平均回收率为98.4%,延胡索乙素与其相邻杂质峰的分离度符合要求。结论 本方法简便、专属、重复性好,可用于延胡索乙素的定量分析。 【关键词】 复方金蒲片;延胡索乙素;高效液相色谱法;含量测定   Abstract:Objective To develop a method for determination of tetrahydropalmatine in Compound Jinpu Tablets. Methods RP-HPLC method was used with Hypersil BDS-C18 column, the mobile phase was methanol-5% acetic acid (40∶60) adjusted pH to 4.7 by ammonia, flow rate was 1.0 mL/min, and column temperature was 25 ℃, with the detection wavelength at 280 nm. Results The linear correlation was observed for the concentration of 0.436~2.180 ?g (r=0.999 7). The average recovery was 98.4%. Resolution between tetrahydropalmatine and other peaks met the requirements. Conclusion The method is convenient, selective and reproducible for quantitative analysis of tetrahydropalmatine.   Key words:Compound Jinpu Tablets;tetrahydropalmatine;RP-HPLC;content determination   复方金蒲片是广西肿瘤研究所根据传统的中医药理论研制的民族药制剂,由金不换、蒲葵子、黄芪、螺旋藻等药物组成,具有活血祛瘀、行气止痛的功效,用于气滞血瘀证之肝癌等的治疗,配合放疗、化疗有增效作用。方中君药金不换为防己科植物华千金藤的块根,其主要成分为延胡索乙素。延胡索乙素的含量测定方法有紫外分光光度法[1]、薄层扫描法[2]和高效液相色谱法(HPLC)[3]。因紫外分光光度法和薄层扫描法测定产生的误差较大,故本试验拟用HPLC法测定复方金蒲片中延胡索乙素的含量,以更好地控制该制剂的质量。   1 仪器与试药   高效液相色谱仪:岛津LC-10ATvp泵,SPD-10Avp紫外检测器,威玛龙色谱工作站,BUG25-12超声波清洗机(上海必能信超声波有限公司)。复方金蒲片(广西医科大学制药厂生产,批20030902;延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所)。甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。   2 方法与结果   2.1 色谱条件   色谱柱为Hypersil BDS-C18(5 ?m,250 mm×4.6 mm);流动相为甲醇-5%乙酸(40∶60),并用浓氨试液调至pH 4.7;流速为1.0 mL/min;柱温25 ℃;检测波长为280 nm;进样量为10 ?L。理论塔板数为7 100,延胡索乙素与相邻杂质峰的分离度很好。色谱图见图1。   A B   注:A.对照品;B.供试品;1.延胡索乙素(9.62 min)   图1 复方金蒲片HPLC图谱   2.2 溶液的配制   2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对照品10.9 mg,加甲醇溶解,并置50 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,作为对照品储备液。吸取对照品储备液25 mL置50 mL容量瓶中,制成每1 mL含0.109 mg的溶液,作为对照品溶液。   2.2.2 供试品溶液的制备 取复方金蒲片20片,去除糖衣,研细,精密称定,取1 g,精密称定,置50 mL离心管中,加甲醇10 mL

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