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水母毒素分离提取及溶血活性探究 　【摘要】 　　目的 研究水母毒素的提取及其溶血活性的影响因素。方法通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等操作从水母触手的刺丝囊中提取毒素，采用分光光度法对水母毒素的溶血活性进行测定，并研究了温度、浓度和二价金属离子等因素对毒素溶血活性的影响。结果水母毒素的溶血活性对温度敏感，随着浓度的提高而增大，并且依赖于Ca2+，Mg2+等二价金属离子的存在。 结论水母毒素具有较强的溶血活性，但不稳定。 【关键词】 水母毒素；提取；溶血活性 　　Abstract:ObjectiveTo study the extraction and the affecting factors to haemolytic activity of jellyfish venom.MethodsJellyfish venom was extracted from the oral arms with tentacles through such operations as soaking in buffer solution and disrupting cell in supersonic wave. Activity of the venom to chicken red blood cells was detected by spectrophotometric method. The effects of factors such as temperature, concentration, divalent metal cations on the haemolytic activity were studied. ResultsThe haemolytic activity was temperature-sensitive, and improved with the concentration increase. The presence of Ca2+,Mg2+ wass necessary for haemolytic activity.ConclusionThe haemolytic activity of jellyfish venom is relatively strong, but it is unstable. 　　Key words:Jellyfish venom; Extraction; Haemolytic activity 　　生物毒素是生物活性最高、毒性最大的一类化学物质，对探索生命运动过程和发展新药均有重要价值。药物是指对失调的机体呈现有益作用的化学物质。药物的药理活性和毒副作用主要取决于药物分子的化学结构。化学结构与药物效应之间的关系（即构效关系）是药物研究的重要依据。海洋生物毒素所特有的化学结构使其极有可能成为特异的高活性、高药效的先导化合物，以具有确定药理效用的海洋毒素为先导化合物，对先导化合物进行结构或性能的改造，寻求新的疗效更好的药物是当前新药研究的重要方向之一［1,2］。 　　水母属于腔肠动物门，是一个重要的海洋浮游生物类群，它种类多、数量大，分布广泛，我省黄海领域就具有丰富的水母资源，主要的水母品种有海蛰、海月水母和多管水母等。对于具有食用价值的海蛰已经于2004年实现了全人工育苗养殖，如江苏连云港市已经在赣榆、宿城、燕尾港等地建立了养殖基地。水母在食用及药用上都具有研究、开发的价值，自古以来水母用于传统中药，有清热解毒、软坚散结、降压、抑菌、抗衰老的功效，可用于治疗高血压病、气管炎、哮喘、胃溃疡、中枢神经系统疾病等，并可作为神经组织的活性物质和组织胺释放剂。水母的触手上分布着腔肠动物所特有的刺丝囊，其中含有大量的毒素成分。毒素蛋白是水母的主要活性成分之一，它是结构新颖独特的肽类毒素，具有多种生物活性，如溶血性、酶活性、神经毒性、皮肤坏死、肌肉毒性、肝脏毒性以及心脏毒性等［3,4］。 　　溶血毒素(Hemolysin)是指多由病原微生物所产生的，能导致机体红细胞及其他有核细胞裂解的毒素类物质，它存在于环节动物、节肢动物、软体动物、棘皮动物等动物的血清或体液中，可以单独作为调理因子或通过蛋白水解酶发挥作用，其活性大小通过溶解（水解）脊椎动物的血细胞表示，最终的溶解效应被称作溶血活性。目前溶血毒素研究以微生物为主，无脊椎动物溶血毒素研究报道非常少，有关水母毒素溶血性能的研究报道很少［5］。本实验通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等技术从水母触手的刺丝囊中提取水母毒素，采用分光光度法对其溶血活性进行测定，并研究温度、pH 值、金属离子等理化因子对其溶血活性的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 水母的采集 　　水母于200607采集于江苏燕尾港附近海域的人工养殖场