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use of biotinylated ubiquitin for analysis of rat brain mitochondrial proteome and interactome使用生物素化的泛素的老鼠大脑线粒体蛋白质组分析和interactome

Int. J. Mol. Sci. 2012, 13, 11593-11609; doi:10.3390/ijms130911593 OPEN ACCESS International Journal of Molecular Sciences ISSN 1422-0067 /journal/ijms Article Use of Biotinylated Ubiquitin for Analysis of Rat Brain Mitochondrial Proteome and Interactome 1 2 1 1 Olga A. Buneeva , Marina V. Medvedeva , Arthur T. Kopylov , Victor G. Zgoda and Alexei E. Medvedev 1,* 1 Orekhovich Institute of Biomedical Chemistry, Russian Academy of Medical Sciences, 10 Pogodinskaya street, Moscow 119121, Russia; E-Mails: olbun@yandex.ru (O.A.B.); a.t.kopylov@ (A.T.K.); vic@ibmh.msk.su (V.G.Z.) 2 Moscow State University, Moscow, 119991, Russia; E-Mail: marmed64@yandex.ru (M.V.M.) * Author to whom correspondence should be addressed; E-Mail: professor57@yandex.ru; Tel.: +7-4992450509; Fax: +7-4992450857. Received: 27 July 2012; in revised form: 22 August 2012 / Accepted: 3 September 2012 / Published: 14 September 2012 Abstract: Applicability of in vitro biotinylated ubiquitin for evaluation of endogenous ubiquitin conjugation and analysis of ubiquitin-associated protein-protein interactions has been investigated. Incubation of rat brain mitochondria with biotinylated ubiquitin followed by affinity chromatography on avidin-agarose, intensive washing, tryptic dige

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