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超滤制备车前草可溶性膳食纤维探究 　 作者：肖小年, 易醒, 马永花，张建民 【摘要】 　　目的探讨超滤膜分离法制备车前草可溶性膳食纤维的可行性。方法高效液相色谱（HPLC）法测定可溶性膳食纤维组分分子量, 选用分子量为10万的中空纤维超滤膜进行截留。结果可溶性膳食纤维两个组分的分子量分别为：1.81×105和2.0×106，超滤制备的可溶性膳食纤维含量为80.4%。结论该方法采用全物理过程，工艺简单可行，产品纯度高。 【关键词】 可溶性膳食纤维；超滤；车前草；分子量 　　Abstract：Objective To test the possible preparation of soluble dietary fiber(SDF) from Plantago asiatica by using ultra filtration. MethodsThe molecular weight of SDF was determined by HPLC and the 0.1million molecular weight of hollow fibrous ultra filtration membrane was used. ResultsThe purity of prepared SDF was up to 80.4%. ConclusionThis method is a purely physical process, it is simple and feasible, and the purity of product is high. 　　Key words：Soluble dietary fiber；Ultra filtration; Plantago asiatica L; Molecular weight 车前草，为车前科(Plantaginaceae)车前属(Plantago)多年生草本植物，种子和全草皆可入药。车前草水溶性膳食纤维（soluble dietary fiber; SDF）含量较为丰富，膳食纤维主要用于治疗便秘，预防结肠癌。水溶性膳食纤维还具有辅助降血脂等功能。超滤为膜分离技术的一种，超滤过程无相变，能耗低，处理能力强，已广泛应用于中药有效成分的分离及浓缩［1］。本文旨在测定车前草可溶性膳食纤维组分的分子量基础上，选用合适的中空纤维超滤膜截留可溶性膳食纤维，探究膜分离法制备可溶性膳食纤维的可行性，以应用到工业生产中。 　　1 器材 车前草（江西吉安人工栽培,7月采收），葡萄糖、硫酸、苯酚、无水乙醇均为分析纯、Dextran T系列(Pharmacia 公司)。CLW（N）005型超滤膜组件和CL型蠕动泵（北京旭成超滤设备厂），UV-2000型紫外分光光度计（尤尼柯仪器有限公司）；高效液相色谱仪系统(Waters公司)； SK2200H型数控超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。 　　2 方法 　　2.1 高纯度可溶性膳食纤维的制备及组分分析车前草按固液比1∶15加95%的乙醇于60℃下回流6 h，挥干乙醇，粉碎过60目筛，得车前草粉。取车前草粉加蒸馏水浸泡，超声提取30 min,调节pH值分别用淀粉酶、蛋白酶和糖化酶处理［2］，滤液经Sevage法洗蛋白1次，再用透析袋(1万D)透析12 h,透析液浓缩到适合体积，加4倍体积量的无水乙醇醇沉1 h，离心分离，将沉淀用无水乙醇润湿室温挥干，再置于105℃热风烘干，用超纯水配成1 mg/ml的样液，过0.4 μm孔径滤膜后进HPLC分析组分,进样量10 μl，流动相为超纯水，流速0.6 ml/min。 　　2.2 标准曲线的绘制精确称取不同分子量的右旋糖苷标品0.100 g，用流动相溶解并定容到100 ml,终浓度为1 mg/ml。按上述色谱条件分别进样，以不同分子量标准右旋糖苷的保留时间（RT）为横坐标，以分子量对数值（LogMW）为纵坐标绘制曲线。 　　2.3 样品预处理将车前草洗净后于105℃热风烘干，用蒸馏水100℃浸提1 h，固液比1∶20（g/ml）；用4层纱布过滤，滤液离心（10 000 r/min）20 min,离心后用慢速滤纸抽滤一次，滤液过超滤设备。多糖浓度测定参照苯酚-硫酸法［3］。 　　2.4 溶质截留率的计算溶质截留率可以用下式表示：Rabs=1－Cp/Cb，式中Rabs为截留率；Cp，Cb分别为透过液和原料液中溶质的浓度。 　　2.5 膜通量的计算膜通量可以用J=v/(A×t)进行计算。式中J为膜通量(L/m2·h)；V为透过液体积(L)；A为膜的有效面积(m2)；t为操作时间(h)。 　　　3 结果与讨论 　　3.1 HPLC分析结果标准分子量右旋糖苷方程为Y=-0.3165X+8.8946 (R2 =0.992