生物材料表面蛋白质微图形对人体软骨细胞形态及蛋白表达的影响.PDF

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2010, 37(12): 1296~ 1302 生物材料表面蛋白质微图形对人体软骨细胞 形态及蛋白表达的影响* ** 潘长江 董云肖 聂煜东 王远亮 (重庆大学生物工程学院，生物流变科学与技术教育部重点实验室，重庆400044) 摘要 主要研究采用微接触印刷术在生物材料表面制备的细胞外基质蛋白微图形对人体软骨细胞粘附、铺展以及蛋白质表达 等细胞行为的影响 研究结果表明，蛋白质微图形表面对细胞的粘附、铺展、排列以及细胞蛋白质表达具有明显的影响 细 胞优先粘附在微图形蛋白区域，微图形形状以及尺度明显影响细胞的粘附形态以及铺展程度，同时也影响细胞生长过程中的 型与 型胶原蛋白的表达，细胞的铺展行为与细胞的蛋白质表达具有一定的 相关性，铺展较好的细胞表现出更好的 型 遇 与 型胶原蛋白表达 结果表明，通过在材料表面制备细胞外基质蛋白微图形可以有效调控人体软骨细胞的生长行为与 遇 功能 关键词 软骨细胞，微图形，蛋白质表达 学科分类号 Q291，R3 18 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 10.00319 由于人体软骨的再生能力较差，因此软骨缺陷 兴起的操作简单、价格低廉的软平板印刷术(soft [1] lithography) ，利用这种技术可以在生物材料表面制 治疗仍然面临挑战 目前，主要采用自体软骨、 异体软骨以及人工生物材料来修复缺损或病变的软 备从纳米到微米级的微图形生物活性表面[7] 本文 骨组织 自体软骨的来源有限，并且移植时会造成 通过微接触印刷术将骨形态发生蛋白2(BMP-2) 固 [2] 供体的二次损伤 异体软骨的潜在免疫反应以及 定在聚苯乙烯(PS)材料表面，从而制备了一系列的 [3] 较高的感染率可能会导致软骨功能的缺失 此 细胞外基质微图形，期望通过材料表面性能的图形 外，也有采用骨膜修复的方法治疗软骨缺陷，但是 化调控细胞的生长行为与功能 研究结果表明，具 其长期效果不佳[4] 因此，非常有必要发展 的治 有微图形细胞外基质的材料表面能够显著影响细胞 疗病变或缺损软骨组织的手段与方法 近年来，组 的粘附铺展行为，并进一步调控细胞的功能 织工程的发展为软骨组织的完全替换或修复提供了 1 材料与方法 的方法 对于软骨组织工程来说，软骨细胞在支 架材料表面上的生长行为对于组织工程软骨的研究 1.1 材料与试剂 具有重要意义 细胞的粘附生长行为不仅与材料表 以下试剂购自Sigma 公司：骨形态发生蛋白2 面的化学微环境有关，还与表面生物活性分子分布 (BMP-2)，5- 羧基- 四甲基若丹明N- 琥珀酰亚胺酯 [5-6] (TMRA) ，磷酸缓冲液(PBS，pH 7.4)， 型胶原蛋 的几何结构和微图形形貌结构有关 ，因此，通 遇 过对材料表面的生物活性分子进行精确的微图形设 白 3 兔多 隆抗体， 型胶原蛋白鼠多 隆抗体, 琢 计，从而构建微图形生物活性表面，可同时改变表 面的化学微环境以及建立精确的微图形结构，有效 调控细胞的生长行为和功能，从而有利于通过组织 * 国家自然科学基金资助项目.