BPA暴露导致F2代胰岛素抵抗效应及其表观遗传机制的研究.pdfVIP

显地全基因组低甲基化现象。同时，BPA 暴露所导致的F2 代胰岛素抵抗和糖耐 量异常，F2 代肝脏Gck 基因甲基化模式的改变，以及F1 代精子Gck 基因甲基 化模式的改变，与F1 代能量代谢紊乱症状和F1 代神经行为发育异常之间没有显 著地相关性。提示F2 代所产生的现象时由F0 代母鼠围产期暴露于BPA 所直接 导致的。 本研究的结论是，F0 代妊娠和哺乳期BPA 暴露可引起F2 代的胰岛素抵抗 和糖耐量受损通，而DNA 甲基化的改变是主要的作用机制。 然而F1 代的精子 中所携带的BPA 暴露导致隔代能量代谢紊乱的表观遗传信息靶点有待进一步地 阐明。 第一部分：F0 代围产期BPA 暴露对F2 代糖耐量和胰岛素抵 抗的影响 目的：研究F0 代母鼠怀孕和哺乳阶段BPA 暴露对F2 代糖耐量和胰岛素抵抗的 影响。 方法：将F0 代孕鼠随机分为对照组和BPA 暴露组，从受孕第 0 天开始分别进 行玉米油和BPA （40 μg /kg body weight/day ）灌胃染毒。F1 代雄鼠大鼠成年后 与未受到过BPA 暴露的成年雌性大鼠交配，以此产生F2 代大鼠。F2 代大鼠出 生后，记录每窝产仔数，并持续测量其体重变化和摄食量的变化。F2 代大鼠出 生后的第9 周和第20 周，通过胰岛素耐量实验（ipITT ）和葡萄糖耐量实验来评 价F2 代大鼠的胰岛素抵抗情况和糖耐量水平。同时用血糖仪分析F2 代大鼠的空 腹血糖水平，以及使用采用ELISA 法分析空腹胰岛素、血液瘦素和脂联素水平， 并通过血糖和胰岛素水平计算F2 大鼠胰岛素抵抗指数（HOMA-IR ）。同时分析 F2 代GTT 实验曲线下面积与F1 代GTT 曲线下面积及F1 代水迷宫逃避潜伏期 之间的关联性。 结果：F2 代大鼠的每窝死亡率也未受到F0 代母鼠BPA 暴露的影响。F2 代各组 组间的产仔数差异、性别比例以及仔鼠出生体重的差异均没有统计学意义 （p ＞ 0.05 ）。同时与对照组F2 代相比，BPA 暴露组F2 代在生长国产中各个时间点的 体重和摄食量上也均无统计学差异（p ＞0.05 ）。BPA 暴露组F2 代大鼠与对照组 3 万方数据 F2 代大鼠的空腹血糖、瘦素和脂联素之间的差异无统计学意义（p ＞0.05）。然而 与对照组相比在F2 代大鼠出生后第20 周，BPA 暴露组的空腹胰岛素水平明显升 高（p ＜0.05）。通过计算胰岛素抵抗指数发现，BPA 暴露组亦有明显升高（p ＜0.05）。 同时，葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验的结果显示，BPA 暴露组F2 代大鼠，其 的糖耐量水平和胰岛素耐量水平均明显下降 （p ＜0.05）。同时F2 代GTT 实验曲 线下面积与F1 代GTT 曲线下面积及F1 代水迷宫逃避潜伏期之间不具有关联性。 结论：F0 代母鼠怀孕和哺乳阶段BPA 暴露可以导致F2 代糖耐量受损，出现胰 岛素抵抗的症状。 关键词：BPA，F2 代，胰岛素抵抗，葡萄糖耐量， 第二部分：F0 代围产期BPA 暴露对F2 代能量代谢相关基因 及肝脏Gck 基因甲基化的影响 目的：研究F0 代母鼠怀孕和哺乳阶段BPA 暴露对F2 代大鼠能量代谢相关基因 及肝脏Gck 基因甲基化模式的影响。 方法：将F0 代孕鼠随机分为对照组和BPA 暴露组，从受孕第 0 天开始分别进 行玉米油和BPA （40 μg /kg body weight/day ）灌胃染毒。F1 代雄鼠大鼠成年后 与未受到过BPA 暴露的成年雌性大鼠交配，以此产生F2 代大鼠。采用荧光定量 PCR 法检测Gck, NR4A3, NR4A1, IRS-2 and SREBP-1c 等基因的相对表达水平。采